1。1 供试昆虫 2

1。2 赤拟谷盗头部RNA的提取 2

1。3 cDNA第一条链的合成 3

1。4 TDT加尾反应 3

1。5 UV视蛋白基因的克隆 3

1。6 UV视蛋白基因序列的数据分析 6

2。 结果和分析 6

2。1 赤拟谷盗UV视蛋白基因的克隆与序列分析 6

2。2 UV视蛋白基因序列比对 8

2。3视蛋白UV基因系统进化分析 10

3 讨论 11

参考文献 12

致谢 14

前言视觉是昆虫感知外界环境的重要途径。复眼是主要的光感受器官，位于昆虫的头部两侧[1]，其形状也是多样的，一般表现为圆形、卵圆形和椭圆形[2]。昆虫的复眼由许多小眼组成，小眼的数目和面积决定了复眼的特性[3]。小眼存在角膜、晶锥、感杆束、色素细胞和基膜这些结构。昆虫的复眼在对不同光强的接受和处理上很精巧，它可以接受很大范围的光强，通过屈光器接受外界的光源，然后将光源送入到感光束，在光通过感光束后，色素细胞开始有规律的移动可以横向的也可以是纵向的,通过色素细胞的移动来调节适应光的强度[4]，这和我们人类瞳孔的作用原理是相通的。但在不同的昆虫中它们复眼调节和适应光强度的具体机制是不一样的[5]。昆虫复眼中的隔光器能够调节光线进入的量，它可以有效地阻隔小眼不需要或者对小眼有伤害的光线的进入，它的作用就像人类眼睛中的虹膜。隔光器的成分主要是视觉色素细胞，而这些视觉色素细胞又可以分成几大类，主要是主色素细胞、虹膜和网膜色素细胞等[6]。色素细胞在小眼中的作用就像阻隔器一样，它可以将小眼分隔开；已有研究报道，大量的色素颗粒存在于小网膜细胞中，这些色素颗粒在小眼接受光的过程中起到很大作用，它们可以通过移动来改变光感受器的进光量，而这些色素颗粒的运动又和外界的光暗改变紧密相关。这些色素细胞之所以能具有这样的作用是因为色素细胞中具有对光谱的敏感的视色素[7]。视色素是由视蛋白、发色团组成的，在生物长期的进化中发色团的形式只有几种，且大多数生物的发色团是相同的，所以视色素的作用主要取决于视蛋白的不同[8-9]。

视蛋白是一类主要由视觉细胞产生、分子量约30 ～ 50kDa的跨膜蛋白[10], 根据其蛋白结构, 它们实为G蛋白耦联受体超家族, 包括一个胞外氨基末端、七个跨膜结构域和一个胞内羧基末端, 视蛋白借位于第七跨膜域的赖氨酸和视黄醛生色团的Schif f碱结合，从而发挥作用。

赤拟谷盗，鞘翅目，拟步甲科，是一种重要的世界性储粮害虫。分布在中国大多数省区，世界热带和较温暖地区。 寄主有食用菌、玉米、小麦、稻、高粱、油料、干果、豆类、中药材、生姜、干鱼、干肉、皮革、蚕茧、烟叶、昆虫标本等。主要危害面粉，该虫有臭腺，可分泌臭液，使面粉发生霉腥味，其分泌物还含有致癌物苯醌。国外已有学者对赤拟谷盗(Tribolium castaneum)进行了全基因组测序，其结果显示赤拟谷盗体内只含有LW视蛋白和UV视蛋白，而B视蛋白已经丢失。研究发现赤拟谷盗每个小眼含有8个光感受细胞R1-R8，且R1-R8细胞中都表达LW视蛋白，只有R7中表达UV视蛋白[11]。