目录
1. 引言 1
1.1帕金森病概述与帕金森病的症状 1
1.2斑马鱼作为模式动物的生理学特性 1
1.3斑马鱼疾病模型的应用 1
1.4基因Lrrk2与Rsad2 2
2. 实验内容与仪器设备 2
2.1实验内容 2
2.1.1实验内容 2
2.1.2实验流程图 2
2.2仪器设备 3
3. 实验试剂与方法 4
3.1斑马鱼资源管理 4
3.2试剂与配方 4
3.2.1斑马鱼培养试剂 4
2.2.2原位杂交试剂 4
3.3实验方法 5
3.3.1设缸配对、用漏斗收集鱼卵 5
3.3.2收卵具体流程图 6
3.4斑马鱼整胚原位杂交[] 7
3.5胚胎卵黄部位免疫细胞数量统计 9
3.6冰冻切片 10
3.7第二次原味杂交 10
4. 实验结果 12
4.1斑马鱼整胚原味杂交结果 12
4.2总结与讨论 15
5. 展望 15
参考文献: 15
1. 引言
1.1帕金森病概述与帕金森病的症状
帕金森病(Parkinson’s disease, PD),又名震颤麻痹(Shaking palsy),是一种锥体外系功能障碍引起的慢性神经退行性疾病,常发生于中年以上,60 岁以上群体发病率高达1%。在老年人疾病中,帕金森病位居第四,是世界上最常见的退行性神经疾病之一。2005 年全球有450 万人患有帕金森病,预计到2030 年将会有900 万的帕金森病患者。帕金森病的发病原因主要是由于脑黑质多巴胺能神经元(Dopaminergic neurons)变性、死亡,纹状体内多巴胺(Dopaminergic)生物合成能力下降,使得多巴胺递质显著减少,引起黑质纹状体多巴胺能神经功能低下而胆碱能神经功能相对占优势,从而产生运动障碍。帕金森病的临床特征主要为动作迟缓、肌肉强直、手脚震颤、姿势不平衡等,病理诊断Lewy 小体阳性,多巴胺含量降低。第二诊断症状如表情、发音、感官及精神行为出现异常。论文网
目前1.2斑马鱼作为模式动物的生理学特性
斑马鱼(Danio rerio)是辐鳍鱼纲鲤形目鲤科短担尼尔属的一种硬骨鱼,原产于孟加拉、印度、缅甸等地的溪流中,是一种常见的热带观赏鱼。斑马鱼作为一种新型的模式脊椎动物,它有着其他模式动物所不能比拟的特点。①繁殖能力强,一对斑马鱼交配可产卵数百。5个
月后可达性成熟,繁殖周期短,一般7天左右。②胚胎透明,且在体外发育极快,24小时内主要器官原基基本形成。易于活体观察。③交配行为受光周期控制。④斑马鱼价格便宜,