麦冬作为一种药材,它的市场需求量很大,但是因为麦冬的生产周期比较长,再加之它的原生栽培环境的变化,而且多年连作会造成病虫害比较严重,从而使有些麦冬品种的质量降低,甚至会有些假麦冬混淆市场,药材市场上曾经出现过禾本科植物,淡竹叶的干燥块根来充当麦冬[6-7],这个品种经过加工,它的外形和麦冬很相似,但是味道和质地,与正品麦冬是明显不同的,所以现在许多学者都进行了麦冬新部位探索,研究其可药用新部位。麦冬的主要活性成分,一般有甾体皂苷、高异黄酮类、多糖等[8],目前市场上常用药效部位只有麦冬的块根,它的其余部份,特别是大量的麦冬叶子被丢弃,麦冬果实、叶子、须根、块根中所含有的多糖及总黄酮量,是有较大的差异的,并且有一定的规律性。含黄酮顺序:叶子>须根>果实>块根,麦冬叶所含的黄酮其实远高于麦冬的块根[9],另外根据吴笑如等[10]和马军守等[11]的报道,麦冬的须根所含有的甾体皂苷、高异黄酮类、多糖等,其有效成分和块根是一样的, 甚至其含量还高于块根。
据调查分析除了百合科麦冬外,目前市场上还有其它种类的块根充当麦冬块根来用,例如湖北麦冬的干燥块根、短葶山麦冬、阔叶山麦冬的干燥块根[12-14],中国药典(2010版一部)收载前两种植物的块根作山麦冬用。
1。2 麦冬遗传多样性研究进展
各地环境的不同,导致麦冬遗传差异大。我国作为传统药材的出口大宗国,从七五一直到十一五这段时间,综合考察研究了我国现有麦冬的类型、、遗传多样性,并分析了因产地不同导致质量不同等问题。黄玉吉等[15]利用ITS分子标记技术,测定了7个不同产区麦冬和山麦冬18s~26s rDNA-ITS区碱基序列,结果得到的rDNA ITS及5s rDNA全序列、18s和26s rDNA部分序列,序列的长度在6-71bp。通过对各ITS序列的比较分析,可见不同产地的麦冬ITS序列具有一定的差异。张君毅等[16-17]用TRAP和SRAP标记初步研究了短葶山麦冬的遗传多样性,结果表明短葶山麦冬遗传多样性水平较高,并且出现了一定的遗传分化。Li和Park基于RAPD扩增结果[18],获得了4 对SCAR引物,用来区分开山麦冬属和沿阶草属。黄玉吉等[19]使用RAPD标记分析34 个自然种群麦冬的遗传多样性并构建分子指纹图谱,结果表明麦冬遗传差异明显,具有丰富的遗传多样性。徐护朝等[20]利用RSAP对120分不同地理来源的麦冬种质资源进行多样性分析,揭示浙麦冬遗传多样性最高,形态学和地理来源具有高度的一致性。Li等[21]从麦冬cDNA文库中开发了22个EST-SSR标记,用于麦冬和山麦冬遗传多样性和群体结构研究中。据统计分析,目前并无关于浙麦冬种质资源多样性的报道。文献综述
1。3 SSR标记技术概述义
1。3。1 SSR标记技术的原理
SSR标记是以特异引物PCR为基础的分子标记技术,也称微卫星DNA。是指基因组中由1-6个核苷酸的基本单位,重复 DNA序列,广泛分布于不同的基因组,通常小于200bp。在基因组中,相对强的单序列通常是一个特定的微卫星侧翼序列,因此对微卫星侧翼片段克隆和序列分析。根据微卫星的侧翼序列进行人工合成引物,然后进行PCR扩增,把单个微卫星位点扩增出来。SSR标记之所以能揭示比RFLP高得多的多态性,是因为SSR重复数目变化很大。
1。3。2 SSR标记技术的特点
SSR标记技术特点:(1) 具多等位基因的特点,提供的信息量很高;(2) 数量非常丰富,覆盖整个基因组,揭露的多态性高; (3) 每一个位点都由设计的引物顺序所决定,能方便不同的实验室进行相互交流,合作开发引物;(4) 孟德尔方式遗传,呈共显性。