TUNEL细胞凋亡试剂盒 — 南京建成

1。1。3主要仪器

表2  供试仪器名称目录

Table 2  Name of Equipments Tested

仪器名称 型号 生产厂家或地址

超净工作台 GY-CJ-2A 苏州广源

移液器 1000 µl,200 µl,100 µl,10 µl,

2。5 µl 赛多利斯百得文献综述

流式细胞仪 BD AccuriC6 美国BD

酸度计 PH-2602 厦门开普瑞

高速冷冻离心机 TGL-16G 上海安亭

电冰箱 GR-B2378GKD 韩国LG

生化培养箱 SPX-250B-Z 上海贺德

多功能电磁炉 HD4902 飞利浦

超声波清洗器 AS3120A 杭州汇尔仪器

恒温摇床 SPH-1102C 上海世平

立式压力蒸汽灭菌器 YXQ-LS-100SII 上海博迅

漩涡混合器纯（超）制造设备

微波炉超声细胞粉碎机 XH-C

EASYQWD800SL-4

XC-CD 金坛市医疗仪器厂

上海生仪分析技术中国格仕宁波鄞州

1。1。4培养基

SDA培养基(沙堡氏固体培养基)的配制：称取20 g(2 %)葡萄糖、20 g(2 %)琼脂、10 g(1 %)蛋白胨于搪瓷缸，加入1000 ml的蒸馏水溶解后，调节PH值为7。0，搅拌充分后煮沸，121 ℃高压蒸汽灭菌20 min，冷却4 ℃冰箱保存。

SDB培养基(沙堡氏液体培养基)的配制：配制方法同SDA的配制，不加琼脂即可。

1。1。5实验试剂的配制

PBS溶液：母A(0。2 mol/L Na2HPO4)：1000 ml的蒸馏水溶解71。64 g Na2HPO4·12H2O后备用；母液B(0。2 mol/L NaH2PO4)：1000 ml的蒸馏水溶解31。21 g NaH2PO4·2H2O后备用；PH 7。4的PBS: 81 ml母液A + 19 ml母液B，用蒸馏水定容至200 ml，现配现用

0。1 %吐温-80：蒸馏水溶解200 µl吐温-80并定容至200 ml，用超声震荡5 min

TdT酶反应液：每个样品取45 µl平衡液、1 µl Biotin-dUTP、4 µl TdT酶于离心管中并混匀(实验检测5个样品)

无菌缓冲液的配制：50 mM Tris·HCl 7。5+20 mM EDTA+1 mM PMSF

固定液的配制：4 %多聚甲醛溶于PH 7。4的PBS中，需新鲜配制

封闭液的配制：3 % H2O2溶于无水甲醇来:自[优.尔]论,文-网www.youerw.com +QQ752018766-

通透液的配制：0。1 % TritonX-100溶于0。1 %柠檬酸钠，需新鲜配制

1。2实验步骤

1。2。1 C。albicans菌种的活化与接种

将4 ℃下保存的C。albicans菌种，放置培养箱中进行活化(28±2 ℃)，将配制好的SDA培养基倒入三角瓶中用报纸包扎好进行高压蒸汽灭菌，灭完菌后在超净台倒平板，等培养基完全凝固后，将活化的菌种取出在超净台进行接种，用接种环在原菌种挑取后划平板。将平板放置在28±2 ℃培养箱中培养2天。