3。2 实验方法
2MmACR:4。2uLACR→30mlPBS
50Mm多酚:Res:5。706mg→0。5mL DMSO→西域1mL→Res:11。412mg→1mLDMSO
做四个平行,取5个时候点,1。5h,3h,6h,9h,24h 水浴(37℃)
con A+R
PBS 500uL 500uL
ACR母液 500uL 500uL
多酚 400uL RES
DMSO 40uL
DNPH衍生: 62。5mgDNPH+50mL乙腈+3mL 1m HCL
各时间点水浴后的样品各取0。5mL与0。3mLDNPH衍生剂混合反应放置黑暗处2h后液相。
注:水浴后有沉淀的样品取一个PE管将混合的试样取500uL于管内再取0。3mL DNPH+与其混合黑暗处反应2h后离心,取上清液于液相样品管内(实际取样小于800uL同为怕吸入沉淀可用液相专用的小管置于样品管内。
论文网yywy植物多酚除了抗氧化性外,还具有其他功能,如RCS清除剂。我们测试了白藜芦醇对ACR的清除效果。在1。5小时,3小时,6小时,12小时和24小时的时间点上对体反应体系中的ACR进行HPLC的定量测试显示,白藜芦醇都能清除75。6左右的ACR,证明了白藜芦醇能直接与ACR反应,将ACR与蛋白质的作用位点封锁后,在一定程度上对蛋白有保护作用。此种清除作用亦有可能是除了抗氧化性以外,其有效抑制ACR蛋白质毒性的作用之一。
实验结果:
1。5h 液相结果
试剂/平行组 1 2 3
Con 3342032 3351151 3306660
A+R 1703054 1630885 1623902
3h液相结果
试剂/平行组 1 2 3
Con 2828275 3539262 3212080
A+R 1372019 1191759 1067259
6h液相结果
试剂/平行组 1 2 3
Con 2487196 2183940 2596409
A+R 292721 333460 410523
12h液相结果
试剂/平行组 1 2 3
Con 2767439 2678762 2680868
A+R 414331 520559 382526
24h 液相结果
试剂/平行组 1 2 3
Con 1510197 1483402 1458464
A+R 54987 52603