曲克芦丁抑制BDE-47诱导的小鼠肝脏细胞凋亡(2)

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图3-3 小鼠肝脏内质网应激相关指标 5

图3-4 小鼠肝脏细胞凋亡相关指标 6

表清单

表序号表名称页码

表3-1 小鼠肝脏整体损伤指标 4

变量注释表

BDE-47 四溴联苯醚

PBDEs 多溴联苯醚

ALT 谷氨酸-丙酮酸转氨酶

ROS 活性氧簇

P-PERK 磷酸化的PKR-like内质网激酶

P-eIF2 磷酸化的真核起始因子2

GADD34 生长停滞及DNA损害可诱导蛋白

Bax Bcl-2相关X蛋白

Bcl-2 B淋巴细胞瘤-2蛋白

Cleaved-

Caspase-3 切割的半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3

1.绪论

多溴联苯醚(Polybrominated Diphenyl Ethers, PBDEs)是一类含溴的有机卤素化合物，长时间以来，PBDEs作为阻燃剂广泛运用于工业生产和家庭产品之中。一般根据溴原子在苯环上的位置以及数量的不同，将PBDEs分为209种同系物。其中四溴联苯醚(2,2’,4,4’-tetrabromodiphenyl ether,BDE-47)是目前分布最广泛，生物材料中含量最高，对环境和人体毒性最强的多溴联苯醚同系物之一[1]。研究表明，BDE-47对肝脏产生了氧化损伤,具有生化毒性影响[1]。因此，选择BDE-47作为我们的实验材料之一。

曲克芦丁又被称为维生素P4，属于黄酮类化合物的一种，是维脑路通的主要成分，它由芦丁经过生产加工出来，是一种包括一羟乙基芦丁、二羟乙基芦丁、三羟乙基芦丁和四羟乙基芦丁混合物，并且具有多方面的生物活性。研究表明，曲克芦丁可以治疗静脉疾病[2]，对因长距离飞行引起的微血管病[3]同样有效。曲克芦丁在镇痛方面也有良好的效果，其镇痛作用强于阿司匹林，弱于吗啡，镇痛部位主要位于中枢部位[4] 。曲克芦丁有着良好的细胞通透性和生理功能，并且在肝脏损伤中也有一定的保护作用。曲克芦丁在急性肝衰竭和肝损伤中具有保护作用[5]。但是曲克芦丁对于BDE-47诱导的小鼠肝脏细胞凋亡是否有抑制作用尚待研究。

细胞凋亡又被称之为细胞程序性死亡，是广泛存在于各种生物组织中的主动性细胞死亡。传统的细胞凋亡包括两种：死亡受体途径（外源性途径）和线粒体依赖途径（内源性途径）。近年来，由内质网应激的细胞凋亡越来越成为人们研究的重点[6]。本实验从内质网应激介导的细胞凋亡进行研究，探讨曲克芦丁抑制BDE-47诱导的小鼠肝脏细胞凋亡的保护作用和分子机制。

实验通过BDE-47诱导建立小鼠肝脏细胞受损模型，使小鼠细胞发生氧化应激，进而导致内质网应激，最终发生细胞凋亡。检测内质网应激和细胞凋亡的相关指标，来探讨曲克芦丁对BDE-47诱导的小鼠细胞肝脏凋亡的保护作用和分子机制，为持续性有机污染物BDE-47的防治提供了理论依据。

2.材料与方法

2.1实验动物

雄性小鼠（8周龄），体重为32±2g共24只，购自于国家啮齿类实验动物

育种中心分公司（上海，中国）。将这24只小白鼠平均分为4组，每组6只。第一组为Control组；第二组用BDE-47（150mg/kg/day）处理小鼠；第三组用BDE-47（150mg/kg/day）+ Troxerutin（150mg/kg/day）处理；最后一组用Troxerutin（150mg/kg/day）处理。连续灌胃12周后处死。