多种DBPs对动物具有致癌作用。研究调查表明，膀胱癌、直肠癌以及结肠癌等的发病率与DBPs具有潜在的相关性[9-10]。除此之外，DBPs的生殖发育毒性、基因毒性、神经毒性等一系列的毒性被发现。流行病学研究表明，DBPs导致人类心脏畸形、呼吸系统、泌尿 系统、唇裂、后鼻孔闭锁等缺陷的危险性[11]。一些DPBs可以不同程度地影响胎儿的发育，导致自发性流产、早产、死胎、宫内发育迟缓、低出生体重、神经管畸形、口唇畸形、心脏畸形等，严重威胁到胎儿正常的生长发育[12]。因此，DBPs 对哺乳动物乃至人类的健康具有多重危害。上世纪末期，卤乙酸（HAAs）作为饮用水消毒副产物DBPs被首次发现[13]。HAAs的致癌风险性较高且具有“三致”作用(致癌、致畸、致突变)，对人体健康具有很大影响。近年来，HAAs成为国内外DBPs研究的热点。张晓健等[3]利用国际和国内饮用水中消毒副产物的一些有代表性的数据，计算了各种消毒副产物的致癌风险。结果表明，在DBPs的总致癌风险中，HAAs的比例高达90%。HAAs能够对小鼠、家兔等多种哺乳动物乃至人类产生生殖毒效应。HAAs能够引起小鼠生精小管内间质细胞肿胀，干扰精子发生过程，导致精子数量减少和活力降低[14]；导致生殖细胞固缩甚至退化，生殖上皮细胞空泡化，生精阻滞，性功能障碍[15]。在对啮齿类动物实验研究中发现TCAA有可能引起小鼠肝脏肿瘤[10]。虽然近年来国内外逐步提高对HAAs危害的重视，但相关研究特别是对其致毒机理及氯代乙酸的毒性研究十分缺乏。

两栖动物是典型的环境生态安全指示物种。1991年，Wake在Science上首次报道全球两栖动物种群退化的证据。大量文献报道了多种两栖动物种群正面临着严重的衰减问题[16-17]。Hayes等(2002)在Nature上撰文指出环境污染可能是重要的诱因之一[18]。研究表明，两栖类动物减少的原因与其特殊的生理特性和生境密切相关。两栖类动物的皮肤具有较高的渗透性且极易接触受到污染的水环境，使得众多污染物容易在其体内蓄积，从而对其健康产生危害[19]。DBPs广泛存在于水体中，极易攻击两栖动物，造成多个器官的毒效应。From~优E尔L论E文W网wWw.YoUeRw.com 加QQ7520.18766

本研究以检出率最高的卤乙酸之一三氯乙酸（TCAA）为目标污染物，以两栖类动物黑斑蛙为研究对象，采取低剂量暴露模拟实验，明确TCAA对黑斑蛙精子质量的影响及精子损伤，论证TCAA对氧化指标与抗氧化酶活性变化的影响，从而阐明TCAA对两栖动物雄性生殖毒性的分子机理，为TCAA对两栖动物种群产生毒效应提供新的科学依据和理论基础。 

2 材料和方法

2。1 实验动物的处理及组织提取

健康成年黑斑蛙购买自浙江长兴创意生态农业发展有限公司，平均体长为(74。5±4。3) mm，平均体重为(36。6±9。8) g。黑斑蛙在室内盛有2-3cm曝气脱氯自来水(曝3d以上)的玻璃水族缸(实验前用10%的稀硝酸浸泡)中暂养3d后，挑选健壮、规格整齐的雄性黑斑蛙进行实验。实验随机分成5组，每组20只，放置于玻璃缸(30cm×30cm×60cm)中，暴露于2L的三氯乙酸的水溶液中，三氯乙酸浓度分别为 0，1，10，50，100μg/L，时间为14天。采用静态置换法每天更新溶液1次，每周饲喂蚯蚓两次。实验过程中个体死亡率小于5%。暴露结束后，用双毁髓法处死黑斑蛙，取精巢组织，待测。部分精巢组织直接用于精子指标测定和超微结构，剩余部分精巢 组织放入-80℃液氮中保存，待测。

2。2 测试指标及方法

2。2。1精子数量、畸形率、活力测定

将暴露后的精巢放置在离心管中，根据质量体积比加入PBS，用眼科小剪剪碎精巢组织，混匀制成精子混悬液，为测以下指标做准备。