4)过氧化氢酶CAT测定
过氧化氢酶(CAT)可催化H2O2生成H2O和分子氧。可通过加入钼酸铵而使该催化反应停止。剩余的H2O2与钼酸铵反应生成淡黄色的络合物。405nm分光光度计下进行测定,测试步骤根据试剂盒方法进行。
5)谷胱甘肽转移酶GST测定
谷胱甘肽转移酶GST具有解毒作用,可以促使GSH和CNDB(2,4-二硝基苯酚)相互作用生成GS-CNDB。根据GS-CNDB可计算出GSH的活性水平。根据试剂盒法在412nm的分光光度计下进行测定。
6)谷胱甘肽还原酶GR测定
谷胱甘肽还原酶GR在NADPH的作用下,使GSSG发生还原反应,生成GSH。反应发生过程中GSH增加,NADPH减少。可根据NADPH的改变,计算出GR的活力。在340nm分光光度计下进行测定。测试步骤根据试剂盒方法进行。文献综述
7)过氧化物酶POD测定
利用过氧化物酶(POD)对H2O2具有催化作用。在420nm处测定吸光度,对比反应前后吸光度的变化,测得POD的活性水平。测试步骤根据试剂盒方法进行。
3 结果及分析
3。1 TCAA对精子数量、活力、畸形率的影响
表1表示黑斑蛙在0,1,10,50,100μg/L TCAA暴露下与CK组相比下镜子数量、活力及畸形率的变化情况。实验结果表明,经100μg/L TCAA处理14天后,黑斑蛙精巢中精子明显数量减少; 50μg/L和100μg/L TCAA暴露下,精子能动性均显著降低;10μg/L、50μg/L和100μg/L TCAA暴露下,黑斑蛙精子畸形率与对照组相比,均显著上升,并呈现剂量-效应关系。该组数据反映了TCAA对黑斑蛙精巢精子毒性,引起精子质量下降。