3。3结果与分析 14

3。3。1YL2基因的定位与克隆 14

3。3。2 YL2基因功能互补 16

3。4讨论与小结 17

4。总结 17

1、引言

“民以食为天，食以稻为先”。最近5年来，我国的水稻播种面积占了粮食作物播种面积的27。5％左右，水稻产量占了粮食总产量的37。3％以上。水稻是我国单产最高、总产最多的粮食作物。全国大部分人口都以稻米为主食。所以一旦稻米供给不足，就会严重影响人民的生活，因此稻米供求的细微变化都将会导致粮食价格乃至整个物价的波动。水稻产量的高低直接关系到粮食总产量的高低，水稻安全也直接关系到国家粮食的安全。论文网

叶色突变在高等植物中是一种很常见的性状突变，主要表现在叶片颜色的变异，因其大多数能在苗期直接观察，可作为一种标记性状，对植物光合作用、叶绿体发育以及遗传育种等具有较高的研究价值。通过测序分析，发现其中一个ORF的非编码区发生单核苷酸突变，使mRNA产生错误剪切生成新的剪切识别位点，造成蛋白的保守性序列缺失，同时导致突变体中该基因的表达量下降。

因此，我们通过对水稻衰老的研究来帮助我们进行选育高产量的水稻，具有较高的指导意义。

经过多年的努力，各国科学家在水稻叶片衰老的分子机理研究方面取得了一些初步的进展。通过EMS诱变分离为叶片褪绿黄化突变体YL2，表现在整个生长期；与野生型相比，该突变体叶绿素含量下降，叶绿体结构荧光参数的异常发育还不完全，光合能力下降。源-于,优W尔Y论L文.网wwW.youeRw.com 原文+QQ75201,8766

2、水稻突变体yl2的生理学以及光合特性的研究

2。1实验材料

2。1。1材料

水稻黄叶突变体（YL2）是通过恢复水稻恢复系获得（F2）与甲基苯磺酸（EMS）诱变，并与杂交粳稻杂交。突变体和亲本蜀恢和控制材料来自中国的日本晴水稻，水稻水培的方法在温室中，在杭州师范学院和中国水稻基地试验种植研究所，常规肥水管理。

2。1。2试剂

实验所用的常规试剂和药品由北京鼎国和上海生工生物技术有限公司购买。

2。2实验方法

2。2。1水稻叶绿素含量测定

本实验采取丙酮乙醇混合法提取水稻叶片中的叶绿素含量，提取液中的丙酮、乙醇和水按照4。5：4。5：1的体积比新鲜配制使用。选用不同生长时期的野生型和突变体材料yl2，取同一部位的叶片，剪碎，取样0。05g加入20ml提取液，黑暗条件下浸提24h，在此期间轻微震荡3次，使用分光光度计测定浸提液在645nm和663nm波长下的吸光值。重复3次，取平均值。不同光和色素的计算公式如下：

Chla=12。7D663-2。59D645

Chlb=22。9D645-4。67D663

C（mg/gFW）=Chla/Chlb*0。4

Total Chl=Chla+Chlb

2。2。2光合参数的测定

在水稻抽穗期采用Ecotec LI-6400便携式光合测定仪的野生型和突变型植株的净光合速率、胞间CO2浓度Ci，气孔导度和GS TR蒸腾速率、叶绿素荧光参数利用FMS2荧光光谱仪测定。测定了光化学效率、实际光化学效率Y（II）、初始荧光峰和非光化学猝灭参数Y（NO）。是20-30分钟的暗适应后测量数据。具体操作在晴天上午10：00进行测定，选用健壮分蘖的剑叶中部，重复6次，使用平均值进行statistic统计学分析。文献综述

2。3结果与分析

2。3。1水稻突变体yl2形态学的分析