1。3。 论文研究的引出 3

2。 转基因拟南芥纯合来自优Q尔W论E文R网wWw.YouERw.com 加QQ75201.8766 株系的获取及表型分析 3

2。1。  材料与试剂 3

2。1。1。 材料 3

2。1。2。 试剂与仪器 3

2。2。 方法 4

2。2。1。 拟南芥转基因型筛选 4

2。2。2。 转基因植株RNA的提取及SPL基因表达验证 4

2。2。3。 表型观察及数据统计 6

2。3。 结果与分析 7

2。3。1。 转基因植株的获取及验证 7

2。3。2。 CsSPL13的异源表达影响拟南芥主根生长 8

2。3。3。 CsSPL13的异源表达影响拟南芥抽薹时间 10

2。3。4。 CsSPL13的异源表达不影响拟南芥抽薹时莲座叶数量 10

2。3。5。 CsSPL13的异源表达影响拟南芥开花时间 11

2。3。6。 其它表型检测比较 12

2。4。 分析与讨论 13

3。 总结与展望 13

致谢 14

参考文献 15

1。 引言

1。1。 研究历史背景及意义

植物中有一类特有的转录因子SPL(SQUAMOSA promoter-binding protein like), 其编码蛋白含有一个高度保守的DNA结合功能域。此区域由含两个锌原子结合位点的锌指结构区(Zinc-finger motif)组成，在拟南芥中被预测为能特异性识别TNCGTACAA序列，结合SQUAMOSA(SQUA)启动子。SQUA属MADS-box家族成员，在拟南芥中主要影响花分生组织的形态建成以及参与了植物的发育调控。植物miRNA及其靶基因的互作广泛参与了生长发育过程，是精细调控基因表达的一种重要方式。其中miR156的靶基因是植物特有的SPL转录因子编码基因，两者的互作在促进植物从幼年到成年再到开花这一发育时相转变过程中发挥重要作用。论文网

黄瓜（Cucumis sativus。 L）是一种重要的世界性经济作物，近年来已成为了植物分子生物学研究的一种好材料。黄瓜是典型的雌雄同株异花授粉植物。研究发现多个位点上的基因可能影响植株性别分化。在前期的实验中，我们针对野生型黄瓜雌雄花芽分化的分子机制开展了一定的研究。我们通过序列分析发现黄瓜中有14条SPL预测序列，以“津研4号”野生型黄瓜的雌雄花芽为材料，初步的定量PCR结果表明其中2条黄瓜SPL同源基因在在雌花芽中积累量较高，很可能参与了黄瓜性别分化调控，尤其是发育时相转变和开花进程。