目前尚未有关于黄瓜中SPL相关基因的克隆和这些基因参与黄瓜生长发育调控和性别分化的相关报导。我们期望通过研究，了解黄瓜SPL基因与生长发育、成花诱导、花器官性别分化间的关系，探索更多黄瓜性别分化的分子机制和提高黄瓜雌花数量的新方法，为生产实践提供理论依据。

1。2。 研究现状及发展趋势

1。2。1。 SPL基因调控植物不同发育时期的转变

1。2。2。 SPL基因调控果实的发育、形态和大小

1。2。3。 SPL基因调控植物叶的数量

1。3。 论文研究的引出

我们前期的实验表明，黄瓜中的SPL13基因很可能参与了植株性别分化调控，但其具体功能尚未有明确的报道。本研究利用模式植物拟南芥作为研究材料，考察黄瓜CsSPL13基因对拟南芥生长发育的影响：观测比较转基因与野生型植株幼苗的生长情况；测量成年植株抽薹、开花时间，开花时莲座叶数量；统计开花植株的高度、分蘖数和长角果数量等表型数据；分析开花基因的表达状况。期望通过研究明确CsSPL13基因对拟南芥生长发育的影响，并为进一步揭示其调控机制提供新的数据和参考。

2。 转基因拟南芥纯合株系的获取及表型分析

2。1。 材料与试剂

2。1。1。 材料

实验所用野生型拟南芥（Arabidopsis thaliana）为Columbia-0生态型，于光照培养箱内进行培养，光周期均为长日照16 / 8 h，湿度70％，培养温度为21 ℃。

2。1。2。 试剂与仪器

主要试剂：Trizol、限制性内切酶、T4连接酶、克隆试剂盒、大肠杆菌感受态细胞购于Takara宝生物工程（大连）有限公司；PremixTaq试剂盒、DNA Marker、逆转录酶和割胶回收试剂盒购于北京康为世纪生物科技有限公司；抗生素、琼脂糖、MS培养基购于上海生工生物工程有限公司。引物订购和DNA序列测定均由上海生工生物工程有限公司完成。定量PCR试剂SYBR Green Premix ExTaq购自Takara公司。B5基础盐培养基、表面活性剂silwet-L77购自美国Sigma-Aldrich公司。筛选用潮霉素（Hygromycin）购自德国Merck公司。

主要仪器：光照培养箱、PCR扩增仪，电泳仪、离心机、高速台式冷冻离心机、恒温水浴锅、摇床、超净工作台等仪器。文献综述

2。2。 方法

2。2。1。 拟南芥转基因型筛选

pCAMBIA系列载体的筛选使用潮霉素（Hygromycin），筛选浓度为12。5 mg/l。抗性植株移入土中培养直至收种。收获的种子继续在含潮霉素的B5培养基上筛选，幼苗对潮霉素抗性符合3:1分离比的则为单拷贝插入。选取大于12株的抗性苗单株土培，收取下一代种子继续在含潮霉素的B5培养基上筛选培养，子代对潮霉素全抗的即为转基因的纯合株系。