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1。2。1。3琼脂糖凝胶电泳

1）5%琼脂糖凝胶的制作：称取琼脂糖凝胶粉14 g，倒入锥形瓶中，再加入280 mL 1×TAE缓冲液，静置几分钟后放入微波炉中加热直至粉末完全溶解且无小气泡生成，加入两三滴duRed染料，混匀，倒入事先准备好的胶架中，加上梳子，待其凝固；

2）电泳：将凝固后的琼脂糖凝胶置于电泳槽中，加入1×TAE电泳缓冲液使其没过凝胶，点样后在电压220V下电泳大约1小时；

3）获得图像并分析：通过紫外凝胶成像系统获得图像，分析图像。

1。2。1。4 F17基因定位

首先从F2 代群体中随机选取分蘖减少突变体20 株，提取DNA，形成混池，然后用本实验室设计的在12条染色体上均匀分布的196条多态性引物进行扩增，筛选具有连锁趋势的分子标记，接着将剩余的单株也用这两对引物进行连锁分析，以进一步验证目标基因是否在这两对分子标记之间。基本确定突变基因所在位置后扩大定位群体，设计新的引物，完成突变基因的精细定位。