1。2。2 生物方法
1。2。2。1 微生物清除展青霉素的方法
从20世纪60年代开始,研究人员开始寻求一种既安全又有效的真菌毒素的清除方法。其中比较主流的研究方向是尝试着用生物学的方法去清除真菌毒素,即利用微生物将毒素代谢为低毒或无毒的产物和利用微生物来吸附毒素。具体的有一下三种方法:分别为微生物降解展青霉素、微生物拮抗展青霉素和失活微生物吸附展青霉素[6]。
1。2。2。2 拮抗酵母的作用机理文献综述
人们将酵母菌应用于水果表面,从而防治由霉菌所引起的水果的病害,这一类酵母被称为拮抗酵母。2007年Michael等人提出了一个关于生物防治的新概念,即包括以下三点:①使用一种拮抗剂;②诱导生物本身抗性的产生;③诱导生物在活动过程中自发产生一种天然抗菌物质[7,1]。这一理念更新了人们原先对生物防治仅停留在一种生物拮抗剂的认识上。同时这一新的理念也揭示了拮抗酵母发挥拮抗作用的三个重要机理。
1。3 拮抗酵母降解展青霉素后的安全性评价
在利用拮抗酵母降解展青霉素之后,虽然展青霉素被抑制和降解,但是人们不清楚降解产物和拮抗酵母本身是否存在毒性,是否也会对水果,特别是人产生一定的危害。因此,对拮抗酵母和降解后的产物进行安全性评价是非常有必要的。
1。3。1 理想模型—HepG2细胞
人肝癌细胞系(HepG2, hepatocellular carcinoma)来源于一个15岁的白人的肝癌组织中。之所以选用HepG2细胞系作为实验的模型,有以下几点原因:首先,展青霉素(PAT)是经过消化道进入人的体内的,因此肝脏是PAT代谢的最初部位;其次,HepG2细胞同时具有癌细胞的无限增殖能力,并保留了人类正常肝细胞的许多功能;最后,HepG2细胞系还保留了生物转化过程中的Ⅰ相酶和Ⅱ相酶的生物活性。所以,HepG2细胞系被认为是检测外来化合物毒性的理想细胞系[8]。