2实验过程

2.1研究地区概况

浙江天目山国家级自然保护区位于浙江省西北部临安市境内,东经119°23′47″~119°28′27″,北纬30°18′30″~30°24′55″,主峰海拔1506米,所辖地域总面积4300公顷。天目山地区地处中亚热带边缘,濒临我国东南沿海气候属于亚热带季风型,温暖湿润,雨量充沛,雨雾缭绕,地貌复杂,人为干扰较少。整个山区地区由于受地形变化,海拔高度等影响使得植物生长茂盛,植物种类繁多,植物资源丰富,是地球上珍贵的天然基因库。

浙江天目山国家级自然保护区蕨类植物资源丰富,常见的蕨类植物主要有贯众(Dryopteris setosa (Thunb.) Akasawa)、对马耳蕨(Polystichum tsus-simense (Ho-ok.)J.Sm.)、阔羽众(Cyrtomium yamamotoi Tagawa)、有柄石韦(Pyrrosia petiolosa (Christ) Ching)、假长尾复叶耳蕨(Arachniodes pseudo-simplicior Ching)、日本蹄盖蕨(Athyrium niponicum)、长尾复叶耳蕨(Arachmiodes simplicior(Makino)Ohwi)、同形团扇蕨(Gonocormus minutus)、鳞毛蕨(Dryopteris uniformis Makino)、井栏边草(Pieris multifida)、延羽卵果蕨(Phegopteris decursive~pinnata )、紫萁(Osmunda japonica Thunb)、凤丫蕨(Coniogramme japonica (Thunb.) Diels)、江南卷柏(Moellendorf'sSpikemossHerb)、暗鳞鳞毛蕨(AspidiumcycadinumSav.;D.atrata(Wall.)Ching)、银粉背蕨(Aleuritopteris argentea)等22种。

云南省位于中国西南边陲,北回归线穿越省境南部,横跨北热带、南亚热带、中亚热带、北亚热带、暖温带、中温带和高原气候区等7个温度带气候类型,因为地形和气候多样性,云南省动植物资源均十分丰富。云南省的蕨类植物主要有有盖肉刺蕨(Nothoperanema hendersonii)、单牙狗脊(Woodwardia unigemmata)、密果耳蕨(Polystichum pycnopterum)、半育耳蕨(Polystichum semifertile)、苏铁蕨(Brainea insignis)、联合鳞毛蕨(Dryopteris conjugata)、石韦(Pyrrosia lingua)、友水龙骨(polypodiodes amoena)、光亮瘤蕨(Phymatosorus cuspidatus)、紫萁、泡鳞轴鳞蕨(Dryopsis mariformis)、滇东楠钩毛蕨(Cyclogramma neoauriculata)、狗脊蕨(Woodwardia japonica)、皱边石杉(Huperzia crispata)、白桫椤(Sphaeropteris brunoniana)、厚叶铁角蕨(Asplenium griffithianum)、云南凤尾蕨(Pteris yunnanensis)、椭圆叶马尾杉(Phlegmariurus henryi)、半圆盖阴石蕨(Humata platylepis)、单行节肢蕨(Arthromeris wallichiana)等蕨类。

正因为浙江天目山地区与云南省在地势地形、纬度、光照、水分等环境因子差异显著,导致其蕨类植物种类差异较大,而这些蕨类植物体内的总黄酮含量及其抗氧化活性也具有差异,具有深入研究探讨的价值,这是我们选址的依据。

2.2实验材料

2.2.1 采样地点

于浙江天目山国家级自然保护区采样21科33属48种59份;于云南省采样 12科12属12种。

2.2.2 材料处理

采集后的样品全部进行以下预处理过程:样品采集后用水清洗后自然晾干;将每种蕨类植株中连着根部的根状茎和叶分离,分别烘干后粉碎;在正式实验前前用石油醚脱脂进行脱色、过滤后风干, 在温度设定为70℃的烘箱中烘2 h 取出,放入干燥器中备用[3-5]。

2.2.3 仪器药品

蒸馏水(单蒸水和双蒸水);芦丁(中国药品生物制品检定所);乙醇(A.R);亚硝酸钠(A.R);硝酸铝(A.R);氢氧化钠(A.R)。紫外-可见分光光度计(购自上海欣茂仪器有限公司);芦丁(中国医药集团山海化学试剂公司提供);超声波发生器(频率20kHz);移液器,电子天平,恒温水浴锅(购自上海欣茂仪器有限公司)。

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