铁皮石斛,也称黑节草,主要分布于我国浙江、福建、云南等地。在自然状态下,铁皮石斛常常与地衣、苔藓等其它植物混生,以其根系牢牢附着于树皮上或岩石的缝隙之间吸收水分与养料[3]。再加上它的叶面积小,对气候条件要求严格,喜温暖湿润气候或半阴湿环境,且不耐寒,因此野生石斛生长得极为缓慢。总体的繁殖率低下,结实率低,种子小,且无胚乳,萌发率不到5%[4]。通常以分株繁殖,但传统的分株、扦插效率低,操作不当易导致病虫害[5]。

由于铁皮石斛药用价值高,国内外市场的需求极大,因此人们在野外长期进行采挖,造成自然资源濒临枯竭,供应更加紧缺。而受其生长特性和分布范围的局限,自然状态下难以恢复,如何实现石斛的快速培育和生产的课题成为众多学者的研究对象。其中,利用组培的方法进行石斛的快速繁殖技术成为笔者的研究方向。

植物快速繁殖技术是指取部分性状优良植物(如茎尖、腋芽、叶片等)作为外植体进行离体培养,在短时间内获得大量相同遗传性状的植株的组织培养技术,尤其在兰科植物中作用显著。Morel曾在1960年提出关于兰花的无性繁殖方法,即茎尖离体培养,极大地提高了繁殖系数。

在此之后,组培技术越来越多地被应用到观赏植物和药用植物中去。铁皮石斛作为一种珍贵药用植物,一些学者也对其展开研究。在20世纪70年代,国内开始了对铁皮石斛的快速繁殖研究。浙江省最早开展石斛的人工种植,现已形成了较完整的产业链。之后,云南省也开发石斛种苗的繁育和栽培,成品种植逐步规模化。2000年后,广东省开始发展铁皮石斛产业。期间,大量的关于铁皮石斛的组培实验均成功地分化诱导了铁皮石斛并使之快速繁殖。魏小勇等提出有关铁皮石斛的原球茎悬浮系的建立,能够均匀分散原球茎,为扩大种苗规模化培养开创新的途径[6]。蒋波等[7]提出壮苗生根培养基的改良方法,将大小相似、发育阶段一致的幼苗垂直接入添加有不同附加物的培养基,一段时间后对不同培养基中的幼苗生长状况进行分析,发现以香蕉作为附加物的生根壮苗培养效果最佳。王碧琴等[8]经过研究发现更适宜炼苗的环境,当试管苗在生根培养基中出现3~5条不定根,株高约为30~40mm时,可开始炼苗。环境宜在室温光照下,开瓶3~5d后,幼苗的茎质地变硬,抗逆性增强。

但是在实验室培养出的试管苗本身并没有药用价值,需要移栽到大棚放养两年以上,铁皮石斛的有效药用成分才会逐渐积累,而且整个过程十分缓慢,因此如何高效地栽培铁皮石斛,使其积累更多有效成分是目前大量研究学者所热衷的问题。

其中,仿野生栽培法进入笔者的视野。铁皮石斛的仿野生栽培是指根据铁皮石斛自然生长需较强庇荫环境的特点,利用乔木树冠遮荫,将种苗附生于树干、树枝或树杈上,仿造石斛自然状态下的生境进行栽培。仿野生栽培可大规模培养试管苗,使其积累有效的药用成分。姚志鹏经试验发现,石斛苗在龙眼树上贴树栽培和在大棚中种植相比,茎干汁液黏稠感较强,道更清爽甘甜[9]。另外,利用杉木栽培铁皮石斛比在板栗,马尾松,五倍子树及石灰岩中栽培能更快地累积多糖[10]。因此,在仿野生环境下的石斛苗相比大棚种植更具优势。

近年来,铁皮石斛的仿野生栽培是大多数学者的研究方向,但对铁皮石斛仿生栽培的研究还只是处于探索的阶段,尚未有成熟完善的铁皮石斛仿生栽培事例。铁皮石斛仿野生栽培需要有充分的试验支持,才能投入到农业经济化生产。其中,保证种苗移栽的成活率是进行大规模铁皮石斛栽培的关键。本研究将在组培的基础上探索铁皮石斛仿野生栽培最适的条件,提高成活率。其结果可为后续扩大仿野生栽培规模以及鉴定石斛的有效成分研究奠定基础,为提高铁皮石斛的品质和进一步开发利用提供借鉴。

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