②封口　接种后，用封口膜将每个培养基的瓶子的口封住，也可以用无菌的胶带来封口培养皿

③温度　在25℃左右的条件下进行培养，但是具体的培养操作还是要根据具体的植物以及外植体的生活最适合状况来决定。

    ④增殖　植物组织培养的关键性步骤是外植体要增殖，在新梢等形成后由于培养基会枯竭，需要进行继代培养，这样可以有效增大繁殖系数。配置好营养更好地增殖培养基，再将外植体在无菌条件下转入增殖培养基，这样会有利于提高增殖率。增殖培养大约1个月左右后，根据情况选择要不要再增殖。 

    ⑤根的诱导　继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根，必须转到生根培养基上进行生根培养。1个月后即可获得键壮根系。 

（5）组培苗的练苗移栽 

试管苗从无菌到光、温、湿稳定的环境进入自然环境，必须进行炼苗。当试管苗的根原基突起或形成几毫米长的短根时，将其取出，洗去琼脂，载入有少量营养的人工基质中。移栽后，保持高湿度，避免阳光直射和过大的温度波动，经过一段逐步锻炼的过程，再定植到土壤中【5】。

1.1.5植物组织培养的意义及发展展望

植物组织培养技术的发展，对于我们的生活有着很重要的意义，主要有以下几点：

（一）能够将植物遗传变异性提高，改良作物

（1）单倍体育种：通过花药离体培养获得单倍体植株，运用一些化学试剂或物理方法，使染色体加倍，正常二倍体植株能够被得到，这是一条新的育种的方法。育种年限能够被单倍体育种的方法大大缩短，节约大量的人力物力，较快地获得优良植物品种，目前已有大约四十多种植物获得了单倍体植株。我国在水稻、小麦、烟草、柏树、橡胶、优尔椒等植物的单倍体育种的工作上，处于世界领先地位。

（2）子房培养、胚培养、胚珠培养：远缘杂交通常具有不亲和性，为了克服这种情况，胚、子房培养是常用的手段，同时，试管受精和胚珠培养等方法也是经常使用的【13】。

（3）能够选择合适的突变体更好地利用：植物提取单个细胞培养的成功，可以诱导单个植物细胞的突变来寻找有利的变异，然后来培养有利变异的细胞成为完整的植株，使其遗传性状能够稳定的保留下来，这是从细胞水平来改造植物的一种途径。

（4）此外，通过原生质体融合，并以选择胞质链霉素抗性做手段以转移烟草的雄性不育性状，或通过原生质体融合转移胞质的抗林可霉素因子都得到成功。

（二）繁殖植物 

    组织培养中从一个单细胞，一块愈伤组织，一个芽（或其它器官）都可以获得无性系。无性系就是用植物体细胞繁殖所获得的后代。通过组织培养可以做到快速繁殖。1年中从一个芽得到上百个芽，达到快速目的。现在在国内外已掀起"试管苗"热，许多花卉、林木、果树、蔬菜都可通过组织培养进行大规模的无性繁殖。通过组织培养可以进行无病毒植株的培育。病毒是植物的严重病害，据目前已知的来讲，已有五百多种病毒病了。大量的粮食作物收到了损害，其中就包括马铃薯、水稻和小麦以及甘薯。油菜、大蒜等蔬菜类也难以避免病毒病的威胁。果树中也有很多品种在列。石竹、兰花等花卉也深受其害。有的病毒病目前并没有很好的防治方法，不得已将染病植株拔除，这样不可避免的造成巨大经济损失。最早是法国Morel在1952年成功的获得了无病毒的植株，他用的是生长点培养法。后来很多国家、学者都在这方面进行了深入的研究，已经在很多作物上获得了成功。