在水果浆汁制定好后的另一重点确定没食子酸的溶剂和波长的确定,以及各反应条件的确定,包括,反应时间,反应温度,FC显色剂的用量和碳酸钠溶液的用量,用固定其他因素,改变其中一种指标来确定,因为要使测量时尽量多的去检测多酚的含量,因此这其中的斜率要尽量的大,也就是说变化的趋势要大。遵守这一原则就可以测出我们想要的结果了。这一步极其重要,也是实验产生误差的关键一步。
在标准曲线的制定的环节,我们选用了没食子酸作为标准物来制定标准曲线,为了尽量提高标准曲线的精确度,我们选用了7组没食子酸,不同浓度来测定,加入FC显色剂和碳酸钠,水浴,之后测定其吸光度,这一步相对来说还是比较繁琐,很需要耐心,在定容反面不可以出错,从最后的标准曲线的结果上看来还是比较让人满意的。
最后一步是最繁琐,但也是最关键的一步,由于要重复实验三次,也就是要有12个数据从中得出,因此我采用的是分成3次进去,每次四种水中分别实验,这样从某种程度上来说也可以提高实验的随机性和精确度。这一步操作倒是很简单,加入FC显色剂和碳酸钠,定容,水浴,最后是测吸光值,吸光度设置在760nm。关键是要做好编号,由于数据会比较多,切勿混淆。做好数据的记录,带到公式中计算就可以得到最终结果。在整个实验中,容易出现误差的是FC显色剂的制定,容量瓶定容和水浴时间的控制上。
5. 总结
植物多酚作为一类储量丰富、可再生的绿色资源,随着其他一次性资源的逐渐消耗以及环保要求的提高,必将成为人类利用的最重要的资源宝库之一。多酚化学的不断发展,使人们对多酚的利用逐渐从粗放式转向精细化,这是多酚利用的必然趋势。精细化和低污染已经成为现代化工发展的方向,对植物多酚的精细化利用已经成为多酚化学发展的主要内容,这也是天然产物研究和利用所面临的共同问题。
提取多酚的方法还是很多的,但采用FC法测定水果中总多酚含量时,以没食子酸作为标准品,可以看见没食子酸和吸光度有着良好的线性关系,此方法操作简单、速度快、准确度高、设备要求低等优点。从最后的结果上可以看见这次的实验是成功的。此外,从结果上我们可以看见水果中的多酚含量很少,单位都是ug来计算的,但这不影响其在水果中的存在,并且不同水果中多酚含量也是有着很大的差距的,含量最高的橙子是含量最低的梨的4倍多,当然这只是检测了常见水果中的4种,至于哪种水果多酚含量最高现在还不得而知,关键是找到了并证实了光谱分析法的可行和便捷,只要用这种方法对一些水果检测就可以轻松得到想要的结果了。我们应该关注的不仅仅是水果,应该说是所有的植物,水果多酚的检测只是提供一种借鉴或是参考,在所有的植物中提取多酚,保存多酚,利用多酚来造福人类才是最终的目的。
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