植物内生菌是指能于健康植物组织内部完成某一阶段或全部生活史，而不使宿主植物表现出明显的感染症状的微生物类群[6-7]。植物内生菌与宿主于植物微生态系统中所建立的这种稳定的、长期的共生关系在植物内生菌-宿主植物-食草动物生态系统中起着异常重要的生态学作用[8-9]，而发挥这些作用的物质基础则是这些内生菌所产生的丰富的活性物质（如抗生素、激素、诱导物等）及其次生代谢产物（如生物碱、黄酮、萜类等）。并且有研究表明需要内生菌与其宿主相互作用才能合成的化合物往往都是新化合物，脱离两者任何一方这些化合物都难以合成。这些具有新的生物活性骨架的化合物在生理活性物质研究领域可作为先导化合物，对农药、兽药和医药（三药）的开发具有十分重大的意义。目前已有许多活性物质及次生代谢产物被证实存在抗肿瘤、抗病毒、植物生长调节等重要活性。如分离自短叶红豆杉的紫杉醇，其独特的稳定微管的作用使其对于卵巢癌、乳腺癌和直肠癌等癌症均有疗效[10]。由此可见，植物内生菌是一个巨大的微生物新资源库，研究植物内生菌对其宿主植物生长发育的影响能够有效地为农作物及药用植物的选育及栽培提供科学指导。不仅如此，除生长调节类物质外，其他植物次生代谢产物也具有广泛的农用价值及药用价值，应用前景十分广阔[11]。

随着人们对药用植物资源利用的日趋广泛、农药的过度使用以及各类野生资源的过度开采使得野生半夏资源急剧减少，自上个世纪70 年代起，国内多地已开展了现已形成一定规模的半夏人工栽培及选种工作，并且获得了一定的研究成果。然而，半夏喜水忌涝，栽培过程中病害问题（软腐病、基腐病等）日益突出，解决此类问题除了考虑半夏生长的温度、湿度、土壤酸碱度等传统环境因子，半夏内部微生态环境对植株生长的影响同样不容忽视。一方面，宿主植物可以为内生菌提供生长所需营养，并且为其生长繁殖提供必要保护[12]；另一方面，内生菌为提高其生存竞争力而分泌一些IAA、ABA、GA等生长激素物质会促进其宿主生长发育[13]，同时增强宿主植物对抗虫害、病原菌等生物胁迫和高温、高盐等非生物胁迫的抗逆性。此外，内生菌可间接促进植物吸收氮、磷等来加强其摄取营养的能力[14]。本研究对六株半夏内生细菌进行固氮活性、解磷能力（分为无机磷和有机磷）及产IAA能力三项促生指标进行检测，并以小麦促生实验作为初步筛选，探究半夏内生菌对小麦幼苗生长状况的影响，望获得高促生活性的半夏内生菌株，最终指导半夏药材的优质高产。同时，本研究在一定程度上对于濒危植物的保护及药用植物内生菌资源在医药领域的开发具有科学指导意义。

2 材料与方法 

2。1实验材料

2。1。1主要仪器与设备

表2-1主要仪器与设备目录

Table 2-1  Main instruments and equipment directory

仪器名称 型号 厂家

自动高温高压灭菌锅 MLS-302C SANYO Electric Co Ltd

双人洁净工作台 Bo Xun 上海博讯实业医疗设备有限公司

电子天平 BSA2245 北京博医康技术公司

酸度计 FE20K 德国莱驰公司

医用冷藏箱