氯化钠 0。1g 碳酸钙 0。5g
酵母膏 0。5g 去离子水 1000mL
2。1。4其他试剂
Salkowski显色剂:将150mL浓H2SO4缓慢倒入 250mLddH2O中,边加边使用玻璃棒搅拌,待H2SO4溶液冷却至室温后再加入7。5mL0。5M的FeCl3∙6H2O溶液,即配得显色剂[15]。(该显色剂需避光保存)来*自-优=尔,论:文+网www.youerw.com
2。2实验方法
2。2。1内生细菌的活化
(1)取出保藏于超低温冰箱的供试菌株保种管,于超净工作台内使用已灭过菌的竹签挑取少量冻结的菌体,接种至LB液体培养基中(30mL每瓶),于37℃摇床中培养过夜;
(2)锥形瓶中出现菌体浑浊后,取200μL菌体悬浮液涂布至LB固体培养基,37℃恒温培养箱倒置培养10±2h,直至长出单克隆菌落。
2。2。2内生细菌固氮能力检测
将供试菌株以点接的形式转接至无氮培养基上(每个平板可划线分区,接种数株菌),于37℃电热恒温培养箱中培养3-4d,观察其生长状况,并进行转接,转接5次,若菌体仍可以正常生长,则结果视为阳性,反之,则为阴性。
2。2。3内生细菌解磷能力检测
2。2。3。1 解无机磷能力测定
将供试菌株以点接的形式转接至无机磷培养基上(每个平板可划线分区,接种数株菌),于37℃电热恒温培养箱中倒置培养3-4d,观察菌体生长状况以及菌落周围是否产生清晰的透明圈,若有产生,则结果视为阳性,反之,则结果视为阴性[16]。