结 论 16
致 谢 17
参 考 文 献 18
1 绪论
1。1 引言
在生物医学领域中,蛋白质的定量检测与分析,吸引了越来越多人的关注[1]。在许多的疾病诊断、蛋白质的特异性识别是通过抗体来实现的。作为一种新型的蛋白质识别的工具,适配体体现出了其巨大的潜力[2]。
凝血酶是以它的前体凝血酶原的形式存在于身体内的,并且凝血酶在凝血级联反应中起着重要的作用,它是一种丝氨酸蛋白酶有着非常重要的作用[3];促凝血和在凝固反应凝血酶抗凝特性是它的主要特征,Xa因子作用于凝血酶原,然后凝血酶原便会通过蛋白质的裂解作用产生凝血酶;当组织因子和凝血因子在暴露的血管组织处接触时,凝血酶便会聚集在此处,然后凝血酶便会通过激活血小板,将纤维蛋白原转化成纤维蛋白,从而起到止血的作用[4]。一般情况下,血液中凝血酶的含量在纳摩的水平,凝血酶的含量与某些疾病息息相关,因此发展一种可以快速检测凝血酶的方法是很重要的[5]。
近期,一些根据电化学发光[6]、比色法[7]、电化学[8]、荧光 [9]等检测凝血酶的基本检测方法得到了发展。在这些方法中,由于电化学生物传感器可以实现凝血酶的快速高效简便的分析物质,吸引了众多人的关注。
1。2 生物传感器
我们通常将可以把生物信号转换成光信号或电信号的物理换能器和生物活性物质例如酶,DNA,生物膜等相互结合的装置或器械称作为生物传感器(biosensor),它可以在分子水平上实现对物质的微量、快速的分析,是一种先进分析技术与检测方法,它主要是利用了生物敏感膜特异性的识别作用来完成对物质的分析[10]。生物传感器主要是由两部分组成的,第一部分就是分子识别元件(molecular recognition element)它也可称为生物敏感膜(biosensitive membrane),主要有酶,DNA,细胞等,利用它们的某些性质可以特异性的识别需要被检测的物质;第二部分是换能器(transducer)又称为传感器(sensor), 利用它可以将化学或生物信号转换成便于检测的电信号或光信号。需要被检测的物质进入反应系统内,与分子识别元件相互作用,产生生物学信号,这些生物信号再在物理或化学转换器的作用下,将产生的生物信号转换成可以测定的电信号或光线号等,从而测得待测物的浓度,这便是生物传感器的工作原理[11-12]。
随着科学技术的飞速发展,生物传感器得到越来越多人的关注,生物传感器在医学领域、环境监测以及食品领域都起着重要的作用[13-17]。
生物传感器按照换能器分类可分为光生物传感器、声波生物传感器、阻抗电导传感器、半导体传感器、电化学传感器。
1。3 电化学生物传感器
将生物学理论应用于电化学可追溯到本世纪初期。电极要与电解液直接接触,所以为了可以将信号传递给仪器,要形成回路所以电化学体系内至少要含有两个电极。一般来说电化学体系可以分为二电极体系和三电极体系,在本次实验中我们采用的是电化学三电极体系。论文网
三电极体系的三个电极分别是参比电极、对电极、工作电极。参比电极是一个已知电势的电极,参比电极上基本没有电流的通过,可以通过参比电极的电势来确定工作电极的电势,已测出的电位=工作电极电势-参比电极电势。工作电极又称为研究电极,是指在该电极上发生我们要研究的反应。工作电极可以是液体也可以使固体,各种能导电的材料都可以用来当作工作电极。对电极又可以称辅助电极,为了是电解槽中的电流畅通,对电极的作用就是与工作电极形成回路。由于工作电极上发生氧化还原反应,所以对电极上可以安排气体的析出反应或者是氧化还原反应的逆反应。