循环伏安法是种常用的电化学研究方法，它是以三角波形进行反复扫描，可以在给定的电位之间不断进行氧化还原反应[48]。文献综述

 循环伏安法中通常可以利用扫速与峰电流的关系来判断反应的可逆性以及研究电极工程的性质。当氧化峰与还原峰有明显的对称关系，并且峰电流与扫速的平方根成线性关系，此时一般可以判断为可逆反应；当只有单峰时，或峰电位明显受到扫速的影响，随着扫速的改变发生明显的偏移时，一般可以判断为不可逆反应；当同时有氧化峰和还原峰，但两峰不对称，差值大，一般可判断为准可逆过程，即既有一部分可以也有部分不可逆。当峰电流与扫速的平方根成线性关系，表示该反应过程是扩散控制；当峰电流与扫速成线性关系，则可以表示反应过程是吸附过程。

1。6。2  差分脉冲伏安法

    差分脉冲伏安法也是一种常用的电化学研究方法。它的电势波形可以看做是恒定不变的振幅矩形脉冲与线性增加的电压的叠加。差分脉冲伏安法在定量测定物质是的灵敏度很高，现在广泛应用于物质的定量分析。

1。6。3  电化学阻抗谱

电化学阻抗谱（Electrochemical Impedance Spectroscopy，EIS）就是测不同频率下的扰动信号和响应信号的比值，这样就可的到不同频率阻抗的实部Z”和虚部Z”，模值和相位角，再将这些值绘制成曲线，便可以得到EIS的抗谱。得到的Nyquist图是有高频区的一个半圆和低频区斜率为45°的直线构成的，通常半圆部分表示反应是由动力学控制的，高频直线部分是扩散控制。通过Nyquist图的半圆可以得知其半径从而求出电阻，一般半径越大阻值越大。

2  实验部分

2。1  实验材料与试剂

    Apatmer-1 (apt1，序列:5’-SH-(CH2)6-AGT CCG TGG TAG GGC AGG TTG GGG TGA CT-3’)和Apatmer-2 (apt2，序列:5’-GGT TGG TGT GGT TGG AAA A-N3-3’)均由生工生物工程（上海）股份有限公司（上海，中国）合成且经高效液相色谱法(HPLC)纯化。六氟磷酸钾 (KPF6)，高氯酸锂(LiClO4)，乙炔基二茂铁(Ethylnylferrocene)和红菲绕啉二磺酸二钠盐水合物均购自百灵威科技有限公司（上海，中国）。胰蛋白酶(Trypsin, Try)，碱性磷酸酶(Alkaline Phosphatase, ALP)，牛血清白蛋白(Bovine Albumin, BSA)，血红蛋白(Hemoglobin, Hb)，辣根过氧化物酶(Horseradish Peroxidase, HRP)，链霉亲合素(Streptavidin, SA)，凝血酶(Thrombin, Tb)，巯基己醇(6-mercapto-1-hexanol)和五水硫酸铜(CuSO4)均购自Sigma-Aldrich。正常人血清购自上海一基实业股份有限公司（上海，中国）。二甲亚砜等其他试剂均为分析纯，均购自国药集团化学试剂有限公司。实验用水为电阻率≥18。25 MΩ/cm的超纯水。来*自-优=尔,论:文+网www.youerw.com

水虎鱼酸(piranha solution)：98%浓硫酸与30%双氧水以体积比3:1混合得到。Tris-HCl缓冲液：20 mM三羟甲基氨基甲烷(Tris)，140 mM NaCl ，5 mM KCl，1 mM MgCl2，1 mM CaCl2，PH=7。4。

2。2  实验仪器

表2。1实验仪器

2。3  电化学生物传感的制备