1。5。4菌种发酵 5

1。5。5 菌种过滤 6

1。6菌种抗菌活性的筛选 6

1。6。1牛津杯观察法 6

1。6。2 96孔板观察法 7

1。7青霉抑制菌的形态鉴定 7

1。8提取DNA 8

1。9 PCR 9

1。9。1反应体系的制备 9

1。10电泳 10

1。11 菌株ITS鉴定 10

2。结果与分析 10

2。1菌落特征与孢子形态鉴定 11

2。2抑菌活性的筛选 13

2。3 PCR电泳图 14

2。4测序结果 14

3。讨论 14

4。致谢 16

参考文献 16

引言

香榧树是一种雌雄异株具有药用、油用、食用和观赏等多种用途的植株。它属于红豆杉科，是我国特有的油料品种的植株，它的果实也是被作为很可口的坚果在食用。香榧树是中国的原树种，它的外边材为白色的，而内材却为黄白色，软硬适中，常被作为建造家具的材料。香榧树的枝干挺拔高大，叶片细小而繁茂青翠，常被人们栽在庭院或被作为公园、马路的绿化植株。但是此种树却是很难栽种，一般栽种后第一年才开花，第二年零零星星的结果，到了第三年果实才成熟，固有“三代果”之说。香榧在中国的盛产之地为浙江的诸暨市、嵊州市、磐安县、绍兴县、东阳市[ ]，它们被誉为“中国香榧之乡”，其次在2014年江西黎川的香榧树也因其独特性、完整性而被誉为“中国香榧之乡”。香榧是榧属类植物中品质最好的一种果实，常作为干果食用，其果肉里含有50%的脂肪和10%的蛋白质，富含丰富的微量元素钙、铁、锌、硒和维生素[ ]，有很高的营养价值，不仅可以养颜美容，而且具有较高的药用价值，有清肺、润肠、化痰、止咳、治疗痔疮等功效[4]，同时香榧果衣还可以驱蛔虫，它的种皮更是被人们用来提炼芳香精油等原料，李时珍的著作《本草纲目》也曾对它的药用价值做了明细的介绍。香榧的果实形状为橄榄状，每一颗果实都有两个凸起部位，状似眼睛，食用时只要按住凸起的部位就能打开食用，这也是它神奇的地方。香榧树的多种神奇之处令我很感兴趣，于是通过对它的多次分离和鉴定，从中得出了青霉抑制菌。论文网

图1 香榧

Fig1 Torreya grandis

植株的内生菌分为内生真菌、内生细菌和内生放线菌三种，本文介绍的是内生真菌的一种。内生真菌是指从植物组织中发现的一种某一阶段生活的对植物组织没有外在危害症状的真菌[ ],它的传播方式分为两种，种子传播和环境传播，环境传播就是其产生的孢子以风雨为介质而进行的传播[ ]。其实植物与内生真菌是互惠互利的关系，内生真菌通过植株的养分得以生存，而植株借助于体内的内生真菌的帮助得以能够健康的成长。它不仅对宿主植株有抗逆性，还能促进植株的生长。如Prestidge等[ ]研究的被内生真菌感染的黑麦草对阿根廷茎橡皮虫的侵害具有抵抗效果，病虫对被内生真菌感染的植株的食用大大减少，也就是减少了植株的病虫害，食用了被感染植株的病虫的生长速度和存活率明显低于未食用感染植株的病虫，原因是内生真菌可在宿主体内产生一些生物活性物质如生物碱类，生物碱具有毒性，可以改变一些昆虫的取食行为，有的生物碱甚至还有抗虫、杀虫的作用，但是对哺乳动物并没有危害。