2 实验材料与方法
2.1 实验材料
2。2 。1 菌株与质粒
里氏木霉选用里氏木霉QM9414;表达载体Binary vector pCAMBIA-1300(来自于本实验室保存);大肠杆菌采用大肠杆菌DH5a作为克隆宿主。
2。1。2 培养基及其组成
种子培养基组成(g/l):玉米浆2,硫酸铵1。4,硫酸镁0。3,葡萄糖1,磷酸二氢钾2。LB,IM,PDA培养基均参照文献【4】。
2。1。3 工具酶和常用试剂
限制性内切酶(XbaI和HindIII)、碱性磷酸酶、T4DNA连接酶、DNA Marker、RNase抑制剂(都是宝生物工程大连有限公司)、琼脂糖(实验室)DNA凝胶回收试剂。exDNA导纳凝胶回收试剂盒(淮安百慧生物科技有限公司)。来,自,优.尔:论;文*网www.youerw.com +QQ752018766-
2。1。4 主要仪器
DYY-6C型电泳仪(北京六一仪器厂),WH-3微型漩涡混合仪(上海沪西分析仪器厂有限公司)JJ-2增力电动搅拌器(江苏金坛医疗仪器厂),DHG-9145A电热恒温鼓风干燥箱(上海一恒科技有限公司),PCR扩增仪(ABI公司9700型),TV1002切胶仪,SN210C立氏压力蒸汽灭菌锅(重庆雅玛拓科技有限公司),85-1型磁力搅拌器(上海沪西分析仪器厂有限公司),HZQ-F160全温振荡培养箱(哈尔滨市东联电子技术科技开发有限公司),UV6000型紫外可见分光光度计(上海元析仪器有限公司),PH100生物显微镜(凤凰光学集团有限公司),SPX-250B生化培养箱(上海佳胜实验设备有限公司)。