病菌为预先准备好的常温水保存的青枯菌T13,操作步骤如下:
(1)倒平板:按无菌操作要求,在火焰旁操作,取融化并冷却至不烫手的固体培养基,将其倒入无菌培养皿中,培养基的量以铺满皿底为宜,水平放置桌上待其充分凝固,留以备用;
(2)划线接种:使用接种环,从待纯化的青枯菌菌落中沾取少量菌样,在相应培养基平板中划线分离;
(3)培养:在室温下,平板倒置放于温箱内培养,并用记号笔做好标记。
(4)纯化:将之前经过一昼夜培养长好的青枯菌T13菌落挑出,移至新的培养基中继续培养经过4到5次之后的培养得到彻底活化,有侵染性的青枯菌T13。
(5)保存:刮取大小均匀、颜色为乳白色的菌落,将其挑出,在无菌水中震荡,常温水保存。