2。8 Caspase-3 活力检测 6

2。9 PC12细胞Bax和 Bcl-2 mRNA 表达变化检测(real time RT-PCR) 6

2。10 统计学分析 6

3 结果与分析 7

3。1 荷叶总黄酮含量测定 7

3。2 荷叶总黄酮单独给药对正常 PC12细胞的影响 7

3。3 不同浓度荷叶总黄酮对PC12细胞凋亡率的影响 7

3。4 对过氧化氢损伤的PC12细胞中MDA、SOD、CAT以及蛋白质中羰基含量的影响 8

3。5 荷叶总黄酮对H2O2损伤PC12细胞caspase-3活性的影响 10

3。6 荷叶总黄酮对H2O2损伤P12细胞Bax和Bcl-2 mRNA表达的影响 10

结论 12

参考文献 13

致 谢 15

1 前言

神经系统疾病（老年痴呆、帕金森病和中风）的病理机制大多是由于氧化应激损伤神经元细胞造成的[1]。在人体渐渐衰老的过程中，脑细胞中的的物质和能量代谢的异常，导致大量自由基的产生，使中枢神经系统受自由基损伤，造成神经退行性的疾病。生物体在维持生命活动时，会产生必要的氧自由基，但是过量的氧自由基在体内堆积往往会造成脂质过氧化、蛋白质和DNA的氧化，以及防御系统如SOD、过氧化氢酶和GPX等变化，这就会加速细胞的损伤或死亡。由于脑神经细胞膜通透性较高且富含多不饱和脂肪酸，其氧代谢率极高，这最终就会引起其抗氧化能力差，因此脑组织更易遭受自由基的损伤。因而寻找具有抗氧化应激作用的天然药物对于治疗神经系统疾病具有重要的临床意义[2-4]。目前神经元细胞的模型的建立大多采用大鼠肾上腺嗜铬细胞瘤细胞（PC12）损伤模型，这是由于PC12细胞无论在形态、结构和功能上，都具有神经元细胞的诸多特征，能与原代培养的神经细胞说明一致的问题[5]。

1。1 荷叶的应用

荷叶为睡莲科多年生水生草本植物莲（NelumbonuciferaGaertn。）的叶子，我国更是有很充足的资源。先前的研究表明，荷叶在食用和药用两方面具有较广泛的应用，尤其作为一种减肥茶深受人们的喜爱，除了含有一些常规的化学成分外，含有的黄酮类化合物为其主要的有效成分。荷叶总黄酮在生命现象中参与多种细胞活动，对其研究多集中在荷叶黄酮具有降脂减肥、抗自由基、抗氧化、抑菌、抗病毒、防衰老等多种生理活性[6-10]。对其神经系统的保护作用未见报道。本文以H2O2诱导的PC12细胞为模型，研究荷叶总黄酮对PC12细胞抗凋亡效果。探讨荷叶总黄酮在氧化损伤相关疾病如阿尔茨海默病（AD）治疗中应用的可能性，为更好地开发利用荷叶资源提供实验依据。

1。2 荷叶中黄酮的作用

研究表明[6-9]，荷叶黄酮都具有调脂作用，并且，荷叶黄酮能够抑制体外肝细胞合成胆固醇；具有良好的清除自由基的能力，能够有效抑制亚油酸的氧化；同时，荷叶能够促进脂肪细胞代谢，降低脂肪细胞中甘油三酯的合成和脂肪酸的吸入，加强甘油三酯的酶性水解和游离脂肪酸向血中释放，有着一定的降脂减肥作用；通过抗有丝分裂的碱性成分，抑制细胞的有丝分裂，从而抑制细菌和酵母的繁殖，达到其抑菌目的。论文网

2 实验材料与方法

2。1 实验材料

荷叶于2013年采摘于江苏省金湖县，经中国医学科学院药用植物研究所吴海峰博士鉴定为睡莲科植物莲NelumbonuciferaGaertn。 的叶。