较低[4]。线粒体同时还同核编码线粒体蛋白的产物参与氧化磷酸化(OXPHOS)的过程。基于线粒体的序列分析(Mitochonddrial DNA Sequence Analysis),能够通过比较不同种群或者类群的线粒体核苷酸序列的变异,从而统计评估各个种群或者类群的之间的遗传变异情况以及遗传多样性[5]。总结之前的研究,昆虫的线粒体基因的特点有以下几个方面:
1、线粒体个体比较小,结构具有简约的特点。大部分线粒体基因组中不含有内含子部分以及间隔区,同时也不存在重复序列;
2、线粒体的替换率相较于核基因更快,大约高 5~10 倍;文献综述
3、线粒体基因组一般比较稳定。在一般情况下,线粒体基因在遗传过程中大多数是不会发生基因的变异,其中包括基因重组、易位以及倒位等突变;
4、线粒体基因严格地遵守母系遗传的机制,这可以有效地排除一些由于遗传背景所造成的影响;
5、线粒体中含有大量的遗传信息,通过比较系统发育关系等,可以对进化关系有一个初步的认识。
目前,应用于研究物种的遗传进化的线粒体基因片段很多,例如,COI、16S rDNA、COII、Cytb 、ND5等基因片段。截形叶螨Tetranychus truncatus Ehara,是一种广泛分布于中国各地区,为害农林作物的重要经济害虫,寄主范围广泛,它属于蛛形纲Arachnida、蜱螨亚纲Acari、真螨目Acariformes、叶螨科Tetranychidae。成螨群聚叶背吸取汁液,使叶片呈灰白色或枯黄色细斑,严重时导致叶片干枯脱落,影响植物生长[6]。成螨雌螨 体长0。55mm,宽0。3mm。体椭圆形,深红色,足及颚体白色,体侧具黑斑。须肢端感器柱形,长约为宽的2倍,背感器约与端感器等长。气门沟末端呈"U"形弯曲。各足爪间突裂开为3对针状毛,无背刺毛。雄体长0。35mm,体宽0。2mm;阳具柄部宽大,末端向背面弯曲形成一微小端锤,背缘平截状,末端1/3处具一凹陷,端锤内角钝圆,外角尖削。
较早的研究常常使用多种分子标记,例如COI、ITS、Cytb等来研究叶螨属一些叶螨的遗传多样性以及对其进行分子鉴定。然而,与其他叶螨属的叶螨类型相比,基于截形叶螨的分子研究并不多,对其了解也并不深入。本章研究通过对中国截形叶螨自然种群线粒体Cytb序列的扩增、分析,从而分析不同截形叶螨种群间Cytb序列的多样性,并且评估红叶螨的mtDNA-Cytb是否适合作为分子标记应用于对截形叶螨种群遗传分化的研究[7]。来;自]优Y尔E论L文W网www.youerw.com +QQ752018766-
1 材料与方法
1。1 样品采集和物种鉴定
在2015年7月至2016年8月,研究样品为采集10个自然种群的红叶螨样本,共采集377头个体。10个地理种群采集地点分别为福建泉州、河北沧州、黑龙江哈尔滨、湖南石门、吉林长春双阳、辽宁十里河、内蒙古呼和浩特、山东昌邑、山西长治以及陕西宝鸡太白山。我们将这些样本的具体的采集时间、以及其寄主植物和各个样本的采集地点信息见表1。
田间采集样本均保存在无水乙醇中,带回后-20℃保存或立即进行鉴定及DNA提取。截形叶螨的鉴定主要依据成虫形态[8]并进行分子鉴定。
1。2 实验室虫源
将从不同地区采集的截形叶螨在实验室中以隔水法在豇豆叶片(pdf)上隔代饲养,温度为25±1℃,相对湿度70%,光照条件为L16-D8。