网纹草生长忌直射光,散射光最为事宜。夏季阳光较强烈,所以需要适时安装遮阳网,遮光率50%-60% 最为合适。在阴冷的冬季阳光需要充足,中午时分需要对植株稍做遮荫处理,在雨雪天应增加辅助光的照射,这样才能获得叶色翠绿,叶脉清晰,生长旺盛健壮的植株。若网纹草管理不当,长期在过于荫蔽的环境中生长,其茎叶将极易发生徒长,降低叶片的观赏价值。
3。2实验设计及方法
3。2。1实验设计
本实验的研究课题是:盐胁迫对网纹草抗氧化酶活性的影响。故而测定和分析不同盐浓度胁迫条件下网纹草叶片的POD等抗氧化酶的活性成为本实验的主要研究内容。
盐胁迫是一个复杂的生理生化机理反应变化过程,其中MDA含量、蛋白质含量以及叶绿素含量的变化与盐胁迫机理同样有着密不可分的关系。与此同时,这些物质在不同盐浓度条件的胁迫下,其含量的变化与POD等过氧化物酶活性的变化也存在着一定的联系(此点内容在前面的阐述中已提及说明,此处就不再多做赘述。)故而测定网纹草膜脂过氧化程度(MDA含量)、保护酶系统(POD的活性)以及叶片叶绿素组分的含量变化和蛋白质含量变化,也成为本课题的一项重要的研究探索内容。
实验需做好相应的前期准备,有研究材料(网纹草幼苗)的挑选与购置、研究材料的初步成活栽培、研究材料成活后的不同浓度的盐胁迫处理。
研究过程中需定期检测不同浓度盐溶液下网纹草的各项生理生化指标,实验测定时要注意仪器的正确使用以及数据的及时准确记录,对于有问题的数据要及时剔除,并分析原因找到问题所在后及时纠正,以正确的方式重新测定数据。
实验盐浓度的制定:0。1%。0。2%。0。4%。0。6% (蒸馏水为空白对照)
需要测定分析的数据有:
1。丙二醛(MAD)测定;
2。过氧化物酶(POD)测定;
3。叶绿素测定;
4。蛋白质测定。
最后在实验结束后,对记录的数据采用相关方法进行正确的分析,归纳总结出结论,完成最后的结果讨论并撰写成文。
3。2。2实验方法
一、实验材料处理方法
(1)幼苗挑选与购买:在实体店进行选苗(网纹草),选择健康、长势均匀良好的幼苗后,通过商家批量购买,然后进行网纹草的前期栽植;文献综述
(2)幼苗栽植:准备五只长、宽、高分别为:60cm、15cm、20cm的种植槽,每槽填满草炭至槽身2/3处即可。在草炭中均匀栽植网纹草,每槽8株,共五槽,前七天只浇水,维持湿度确保其成活即可;
(3)幼苗处理:七天后开始施加不同浓度的盐溶液,空白对照盐浓度为0,含盐对照组盐浓度分别为:0。1%、0。2%、0。4%、0。6%。施加溶液一周后进行叶片的第一次采集与指标测定;第一次采集后继续适当浇水保持基质湿润,七天后再次采集叶片完成第二次指标测定;重复第一次叶片采集后的工作,直至七天后做最后一次叶片采集及指标测定工作。
三次采集之间进行一次盐溶液的补浇。
二、实验测定方法
(一)实验药品
蒸馏水、NaCl固体、0。1%愈创木酚、0。18%H2O2、5%K2Cr2O7溶液、10%Co(NO3)2溶液、5%三氯醋酸、0。5%硫代巴比妥酸、0。05mol·L-1磷酸缓冲液(pH7。8)、90%乙醇、85%H3PO4、牛血清蛋白标准液、石英砂、95%乙醇。
(二)实验仪器
(1)实验器具:烧杯、玻璃棒、剪刀、研钵1套、离心管、移液枪:1mL、5mL、白容量瓶(10mL、50mL若干)、棕色容量瓶(25mL数个)、具塞试管(10mL、20mL若干)。