(2)将4。9ml ABTS溶液与0。1ml 80%甲醇提取液在试管中充分混合均匀,反应10min。在734nm下测混合液的吸光度,然后用乙醇稀释ABTS溶液和甲醇的混合液,直到吸光度为0。7±0。002为止。
(3)把Trolox溶液倒入含有80%的甲醇的试管中,混匀,作为标样,以标样的吸光度的减少值作为Y轴,Trolox浓度作为X轴,作标准曲线。样品抗氧化能力用ABTS (trolox equivalent antioxidant capacity)表示,以 0。1ml80%甲醇作为空白组。将配置好的样品设置成三个对照组。文献综述
(4)测定结果用葡萄籽提取物清除自由基的能力(单位为g)与Trolox清除自由基的能力(单位为mg)相对比得到,单位为mg Trolox/g,用Trolox抗氧化活性当量来表示;Trolox自由基清除能力的mg数就等同于葡萄籽提取物清除自由基的能力。
3。1。3 FRAP法测定抗氧化活性
取1ml FRAP工作液工作液置于10ml具塞比色管中,分别加入20μl Trolox或葡萄籽提取物(100ppm),均匀振荡,在37℃的恒温水浴中反应15min,样品设置为3个平行组,测定每个样品的吸光度值,求和后取平均值。测定结果用受试物的吸光度值代入Trolox标准曲线的方程,计算出相对应的Trolox浓度,定义为FRAP值(mg trolox/g 提取物),即Trolox自由基清除能力的mg数等同于葡萄籽提取物清除自由基的能力[11]。