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1.7 课题的研究目的及意义
上海作为中国经济发展最快的地区之一，同时也是全国PAHs的高排放区域之一[28]。汽车尾气、燃煤等都是PAHs的潜在污染源。市区不同区域的大气[28-29]、土壤、沉积物、植物等环境介质中都能检测到PAHs的存在。部分研究者对上海孕妇血液中PAHs及妇女尿液中PAHs代谢产物的含量进行检测的结果显示，上海女性PAHs日均暴露量较国外城市要高[30-32]，呼吸摄入是最主要的暴露途径。但总的来说，目前对上海城市人口PAHs人体负荷特征的研究还非常欠缺[33]。论文以居住于上海市典型污染区域中的非职业暴露人群为研究对象，通过问卷调查了解和推测影响PAHs人体负荷特征的环境因素。同时针对孕妇这一特殊人群，选择合作医院，收集志愿者的血液样品，检测其中PAHs的残留种类和水平。
2 实验试剂、材料和仪器设备
2.1实验主要试剂
（1）正己烷
（2）0.4mol/L NaOH—乙醇水溶液(自行配制：V乙醇：V水=9:1，设总体积等于180ml+20ml=200ml，MNaoH=0.2L*0.4mol/L=0.08mol 0.08mol*40=3.2g)
（3）蒸馏水
（4）二氯甲烷
2.2 实验材料
（1）25ml锥形瓶6个
（2）移液枪(两支刻度：20~200μL，100~1000μL)
（3）玻璃棒
2.3 主要仪器设备及装置
（1）电子天平
（2）7890A-5975C型GC—MS联用仪(带电子电离源)
（3）Buchi R．210旋转蒸发仪
（4）弱极性毛细管色谱柱
（5）SKY一100C恒温培养震荡器
（6）固相微萃取装置、C18萃取柱
3 实验内容
3.1 血液样品的采集与处理
（1）血样的采集
所有的血样均来自于上海第八人民医院的孕妇。
（2）血样的处理
从医院取出血样后，将其放入冰袋中，保存在零下80度的冰箱中保存，等做实验时再取出，解冻。
注意事项：
1）血样需满足一份实验，一份保存。
2）血样分管后需贴上标签。
3）血样在采集过程和送至实验室冰箱前，应该低温运输，尽量避免其融化或者受灰尘等污染。
3.2 实验方法与调查结果
血液中PAHs的提取：
1）取2mL血液于25mL棕色锥形瓶中。
2）加入4mL0.4mol/L NaOH一乙醇水溶液(V(乙醇)：V(水)=9：1)，置60°C下水浴30min后取出。
3）向锥形瓶中加入3mL正己烷混匀置于摇床上液一液萃取15min。用带塞的玻璃管收集上层有机相，分别用3mL正己烷重复上述实验2次(每次10min)并把收集到的有机相注入到第1次收集到的玻璃管中。
4）混合后的有机相经旋转蒸发仪浓缩至1mL，置冰箱保存。
SPE柱净化：用Milli—Q Academic超纯水预淋洗C18萃取柱(166．7mg/mL)，再用10mL正己烷和二氯甲烷混合液(V(正己烷)：V二氯甲烷)=l：1)活化，然后把样品注入到萃取柱中，上样，调节压力调节器，使得流量不超过2mL/min。用10mLMilli—QAcademic超纯水淋洗吸附柱，最后用15mL混合液(V(正己烷)：V(二氯甲烷)=1：1)洗脱。把得到的提取液浓缩至lmL；高纯氮气下缓缓吹干，最后定容至100ul：待测。
5）所有样品均利用GC-MS进行分析。电子电离源选择性离子分段扫描，离子源温度230°C，四极杆温度150°C，质谱接口温度250°C，进样口温度290°C，以He为载气，柱流量1.0mL/min，无分流进样，进样量1L。升温程序为：初温70°C，保持4min，以10°C/min的速度升至300°C，溶剂切除10min。
利用GC-MS(Finnigan)检测EPA优先控制的15种PAHs：苊烯(ACY)、苊(ACE)、芴(FLO)、菲(PHE)、蒽(ANT)、荧蒽(FLA)、芘(PYR)、苯并蒽(BaA)、屈(CHR)、苯并[b]荧蒽(BbF)、苯并[k]荧蒽(BkF)、苯并[a]芘(BaP)、茚苯[1,2,3-cd]芘(IcdP)、二苯并[a,h]蒽(DahA)、苯并[ghi]苝(BghiP)。工作条件为J&W DB5-MS毛细管色谱柱，无分流进样，进样量1μL。升温程序为：初温60°C，以5°C/min的速度升至280°C，溶剂切除20min。电子电离源选择性离子分段扫描，离子源温度280°C，四极杆温度150°C，质谱接口温度250°C，进样口温度290°C，以He为载气，柱流量1.0mL/min，以氦气为载气，流速1mL/min，柱头压30kPa。采用2-氟联苯(2-fluoro-1,1′-biphenyl)和氘代三联苯(p-terphenyl-d14)为内标物，同时进行质量控制。