1。3 实验方法研究
本次毕设使用化学方法(皂化反应)来制得4-羟基癸酸(盐),并对其纯度做很高要求,然后进行表征,最后通过生物转化的方法得到γ-癸内酯研究其化学反应动力学。合成路径如图[7]:
下图为代谢过程:
图1。3。1 4-羟基癸酸(盐)制备原理
以4-羟基癸酸(盐)为底物,一般利用蓖麻酸、蓖麻油或蓖麻酸甲酯,经过细菌、酵母菌或其他真菌的转化而形成内酯或其直接前体——相应的羟基脂肪酸,再在菌体细胞内环化形成内酯。羟基脂肪酸在生物转化中先经过氧化缩短碳链,再还原成γ-癸内酯。天然的羟基脂肪酸,比如存在于菌麻油中的菌麻油酸在微生物转化过程中,都是先经过氧化,使碳链缩短,再经内环化转化成GDL[8]。
1。4 本课题的目的及研究意义
4-羟基癸酸(盐)是天然香料丙位癸内酯的重要前体,为了更好地对该生化过程进行代谢控制方面的研究,制备4-羟基癸酸是很有益的,但由于4-羟基癸酸的稳定性较差,过程需要成盐处理。制备物的结构确定也是至关重要的。
在以生物转化蓖麻油的方法代谢合成丙位癸内酯的过程之中,丙位癸内酯的产率非常低一直都是制约生物法生产合成癸内酯的技术工业化的一个重要因素[9]。所以需要寻找一个简单易得的实验方法制备γ-癸内酯并将其工业化是很有必要的。在此次毕设中,不仅需要优化生物转化条件,化合物的结构鉴定也是至关重要的。而且该课题的开展可以为生产菌的环化能力的考察奠定基础。
2。材料与方法
2。1仪器与试剂
2。1。1仪器
烧杯、量筒、药匙、玻璃棒、摇瓶、三口烧瓶、温度计、电力搅拌棒、冷凝管、铁架台、纱布、细绳等
2。1。2试剂
表2。1试剂
试剂 规格 来源
γ-癸内酯 分析纯 中国医药集团上海化学试剂公司
NaOH 分析纯 淄博市周村铭栋化工有限公司
MgSO4·7H2O 分析纯 中国医药集团上海化学试剂公司
K2HPO4
KH2PO4 分析纯
分析纯 中国医药集团上海化学试剂公司
中国医药集团上海化学试剂公司
氯化钙 分析纯 中国医药集团上海化学试剂公司
甘油 分析纯 中国医药集团上海化学试剂公司
磷酸 分析纯 中国医药集团上海化学试剂公司
环已烷 分析纯 中国医药集团上海化学试剂公司
肉碱 分析纯 中国医药集团上海化学试剂公司
活性干酵母 分析纯 中国医药集团上海化学试剂公司
盐酸 色谱纯 中国医药集团上海化学试剂公司
蒸馏水 色谱纯 屈臣氏集团
2。2 仪器与设备