1。1。3 UPLC/MS/MS应用范围

随着联用技术的日趋完善，HPLC/MS/MS逐渐成为最热门的分析手段之一。特别是在分子水平上可以进行蛋白质、多肽、核酸的分子量确认，氨基酸和碱基对的序列测定及翻译后的修饰工作等，这在HPLC/MS/MS联用之前都是难以实现的。HPLC/MS/MS作为已经比较成熟的技术，目前己在生化分析、天然产物分析、药物和保健食品分析以及环境污染物分析等许多领域得到了广泛的应用。

A液质联用生化分析

生物体内的化合物具有强极性、难挥发性，并且具有显著的热不稳定性[2]  ，同时，这些化合物往往以蛋白质、肽和核酸的混合物状态出现，而液相色谱对于不易挥发、强极性、对热不稳定及高分子量化合物的分离能力高；质谱可以对复杂混合物中的化合物进行准确定性，所以液质联用作为生化分析的一个有力工具，日益得到重视。

Henry等对液质联用技术在单克隆抗体结构表征上的应用进行了研究，先采用液质联用对曲妥珠单抗完整蛋白及其亚基（轻链和重链）的相对分子质量进行测定；然后用多种酶（胰蛋白酶和 Asp N）酶解蛋白并用液质联用肽图分析法对曲妥珠单抗的氨基酸全序列进行解析和确定，同时对可能发生的翻译后修饰（PTMs）进行定性和定量分析；再通过PNGase F酶来释放抗体上的糖链并应用液相色谱荧光检测与质谱联用方法对其糖基化修饰进行结构分析及确认，建立了一套单克隆抗体结构表征的平台化方案。

B液质联用天然产物分析

利用HPLC/MS/MS分析混合样品，和其他方法相比具有高效快速，灵敏度高，样品只需进行简单预处理或衍生化，尤其适用于含量少、不易分离得到或在分离过程中易的组分。因此HPLC/MS/MS技术为天然产物研究提供了一个高效、切实可行的分析途国内利用该技术在天然产物研究中已经有很多报道。如李丽等利用高效液相色质谱联用技术研究了朝鲜淫羊蕾中的黄酮类化合物。

C液质联用药物分析

在药物分析研究领域中，大部分药物是极性较大的化合物，而在诸多分析仪器中，液相色谱分析范围广，包括不挥发性化合物、极性化合物、热不稳定化合物和大分子化合物（包括蛋白、多肽、多糖、多聚物等）。质谱特异性强，可以提高较多的结构定性信息，而且检测灵敏度很高。液质联用技术能够对准分子离子进行多级裂解，从而提供化合物的相对分子量以及丰富的碎片信息。在药物研发中的杂质研究和药物动力学研究阶段，通常杂质和药代动力学样品的血药浓度的含量很低，分析难度大且干扰多，液质联用技术由于其选择性强和灵敏度高，可以快速准确地测定药物分析中的痕量物质。

任雪等采用液质联用对国产鲑降钙素注射液中的主要降解杂质进行结构鉴定。贾薇采用液质联用法分析生物样品中四环素类药物和金刚乙胺的代谢物，结果显示，牛奶中四环素，土霉素及美他环素浓度在0。05μg/mL，金霉素在0。1μg/mL时可以准确可靠地被检出。贾连群等采用液质联用技术研究脾虚大鼠血清代谢物谱群特征，对大鼠进行血清代谢组学检测，应用正交偏最小二乘判别分析研究组间代谢物谱图差异，并通过变量重要性投（OPLS-DA）选取血清中与证型相关的生物标志物。结果显示，脾气虚及脾阳虚模型大鼠血清中多种代谢物的相对含量发生了显著变化，并初步获得了一些可能与脾虚证候相关的潜在小分子生物标志物。曹文利利用液质联用技术对白芍总苷、芍药内酯苷和芍药苷在大鼠体内的代谢物进行了分析。结果发现，代谢位点主要为糖苷键、酯键、苯环，胆汁中白芍总苷的代谢物明显多于单体状态。来`自+优-尔^论:文,网www.youerw.com +QQ752018766-