2。1。2 材料 11

2。1。3 仪器 11

2。2裂殖壶菌的培养 12

2。2。1人工海水的配制 12

2。2。2培养基的配制 12

2。2。3裂殖壶菌的摇瓶培养 12

2。3 裂殖壶菌相关测定 12

2。3。1裂殖壶菌的生长曲线测定 12

2。3。2葡萄糖标准曲线 13

2。3。3通过茚三酮反应制作氨基酸标准曲线 13

2。3。4微生物生物量的测定 13

2。3。5微生物油脂含量的测定 13

2。3。6脂肪酸甲酯化方法——两步法甲酯化 14

2。3。7脂肪酸含量的气相色谱分析 14

2。4 裂殖壶菌生长环境优化 15

2。4。1温度 15

2。4。2 初始pH 15

2。4。3盐浓度 15

2。5前体物质对裂殖壶菌的影响 16

2。5。1柠檬酸 16

2。5。2蚕蛹油 16

2。5。3吐温-80 16

2。6发酵过程中油脂累积相关酶活的测定 16

2。6。1酶提取缓冲液的配制 16

2。6。2苹果酸酶酶活测定 17

2。6。3脂肪酸合成酶活性测定 17

2。6。4 ATP-柠檬酸裂解酶活性测定 17

2。7裂殖壶菌利用产油酵母发酵滤液生产DHA 18

2。7。1废水添加比例 18

2。7。2甘油添加量 18

2。7。3水解液添加量 18

2。8 统计分析 18

第三章 结果与讨论 19

3。1标准曲线的测定 19

3。1。1葡萄糖标准曲线 19

3。1。2氨基酸标准曲线 20

3。2裂殖壶菌的生长曲线 20

3。2。1裂殖壶菌的生长曲线 20

3。2。1裂殖壶菌油脂含量和DHA含量 22

3。2。3裂殖壶菌生长过程中葡萄糖含量和氨基酸含量变化 23

3。2。4小结 24

3。3裂殖壶菌培养环境的优化 24

3。3。1温度 24

3。3。2盐浓度 25

3。3。3初始pH 27

3。3。4小结 29

3。4前体对裂殖壶菌产油的影响 29

3。4。1柠檬酸 29

3。4。2蚕蛹油