1。2。3 产油微生物合成油脂的影响因素
(1)碳源
碳在微生物合成油脂的过程中扮演着重要的角色。可被利用的碳源很多,如葡萄糖、蔗糖、淀粉糖化液、乳糖、淀粉厂废水、纸浆工业废水及水解液等,这些都可以作为产油微生物的原料。当葡萄糖作为碳源时,菌体生物量和油脂产量相对都较高,最适合细胞生长和油脂合成。葡萄糖是产油微生物利用最多的碳源。当其他营养成分缺乏时,只要有足够的碳源,微生物就可将过量的碳转化为脂类,从而维持机体正常活动。
(2)氮源
氮在微生物产油过程中也有至关重要的作用。可被利用的氮源,主要有玉米浆、氨基酸、硝酸盐、氨盐及尿素等。其中,有机氮有利于前期细胞的增殖,无机氮有利于不饱和脂肪酸的产生。不同氮源对细胞油脂合成有不同的影响[23]。比如NH4NO3、尿素等适合于细胞生长但不适合油脂的合成。蛋白胨、牛肉膏不适于细胞生长,但有利于油脂的合成,而酵母膏不仅适合细胞生长,而且适合油脂的合成。此外,对氮源限制也会影响油脂的积累[24]。当对氮源限制时,乙酰辅酶A羧化酶的表达就会发生改变,同时该酶活性的变化也影响油脂的累积。
(3)C/N
碳源及氮源在微生物产油过程中有重要作用,碳氮比在微生物生产油脂的两阶段要求不同,但同样重要。氮源有利于产油微生物生长,碳源有利于油脂积累,因此培养前期要求低碳氮比,以便获取大量菌体,培养后期要求高碳氮比,以积累更多的脂质。
(4)前体
为了提高油脂含量,将脂肪酸合成的中间产物或能形成中间产物的C2化合物添加到培养基中,例如乙酸盐、乙醇及乙醛等。另外,可以通过减少之前碳链延长的步骤,来增加DHA含量,例如将C18类短链不饱和脂肪酸直接添加到培养基中。此外,还通过可以添加植物油或其他低级脂肪酸,以提高不饱和脂肪酸的产量。
1。3 微生物油脂的生物合成
1。3。1 微生物油脂的简介
微生物油脂是指微生物在一定条件下将碳源物质在体内转化而成的油脂,又称为单细胞油脂。微生物油脂形式主要为甘油三酯,占油脂总含量的80 %以上,而其中磷脂含量大于10 %。微生物油脂的脂肪酸主要为C16和C18系列脂肪酸,类似于一般植物油,但其不饱和程度高于一般植物油。在油脂生产方面,相对于动植物油脂,微生物油脂有以下优点:(l)不占用耕地和淡水资源,生长周期短;(2)微生物生长所需的原料丰富;(3)不受季节、气候变化的限制;(4)能连续大规模生产;(5)产品附加值较高。大部分微生物在产油的同时,会积累多不饱和脂肪酸和蛋白等高附加值副产品。在现今自然资源日益匮乏与油脂需求却不断增长的情况下,需找新的油脂来源,若可以利用微生物生产油脂,则更具有长远的意义文献综述。
微生物油脂的诞生不仅丰富了油脂学科,而且也为人类增添了多种功能性实用油源,对于我国推广应用微生物油脂更具有特殊意义。但是,微生物油脂在发展中依然面临着以下几个问题:(1)筛选和培育优势产油菌株;(2)微生物油脂的生产加工工艺与精炼方式;(3)微生物油脂在生产过程中产生的废渣和废液;(4)降低消耗,提高得率,最大限度地降低生产成本。因此,把微生物油脂的生产成本降低到消费者能接受的水平上,以推动微生物油脂的发展,造福人民。