1。3。2微生物油脂的提取

油脂的提取方法有索氏提取法、酸热法、超临界CO2萃取法和有机溶剂法。

（1）索氏提取法

索氏取提法可用于脂肪酸的提取，原理是利用有机溶剂长时间回流干菌体，多次重复操作来提取菌体内的油脂类物质，优点是提取效果较好，缺点是样品需求量大，必须经过烘干处理，而且操作时间长，不适合作为菌株快速筛选的提取方法[26]。

（2）有机溶剂法

有机溶剂法[27]的原理是油脂易溶于有机溶剂，利用油脂在各种有机溶剂中溶解度不同的特性将其方便提取。包括氯仿-甲醇法、乙醇-正己烷提取法、乙醇-乙醚法等。氯仿-甲醇法是目前较为遍的一种方法，油脂得率达到20%以上。优点是所需设备简单，油脂得率也较高；缺点是要对菌体细胞破壁，且提取的油脂纯度低，易被污染。

（3）超临界CO2萃取法

超临界CO2萃取法是一种新型的化工分离技术，原理是利用压力和温度对超临界流体溶解能力的影响，优点是有较高的安全性、无溶剂残留，因此在生物活性物质的提取与分离上具有广泛的应用[28]。在菌体油脂的提取上，也已经有不少采用超临界CO2萃取法的报道。研究结果表明，超临界CO2萃取法提取菌体中油脂的效果较索氏法略差，但油脂的脂肪酸组成及含量相近，且样品需要量小，提取效率高，该方法主要缺点是需要专门的仪器设备，一次性投入成本高。来.自^优+尔-论,文:网www.youerw.com +QQ752018766-

1。3。3微生物油脂的合成途径

微生物油脂的积累大体可分为两个阶段。发酵培养的前期为细胞增殖期，微生物消耗培养基中的碳源和氮源来维持菌体的代谢和增殖，在这一阶段细胞也合成油脂，但主要用于细胞骨架的组成。当培养基中碳源充足而氮源缺乏时，微生物细胞分裂速度减缓，细胞不再进行增殖，这时过量的碳元素继续被细胞吸收，在细胞质中经糖酵解途径进入三羧酸循环，正式进入油脂积累期。

生物合成甘油三酯是广泛存在于动植物和微生物界的多酶催化过程，是初级代谢的一部分。目前研究表明，甘油三酯的合成代谢中关键的两个中间产物是磷脂酸（(Phosphatidic acid PA）和甘油二酯（Diacylglycerol DG）。酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae) 细胞中PA的合成与其他真核细胞中PA合成类似，存在两条合成途径， 即甘油-3-磷酸（glycerol -3- phosphoric）途径和磷酸二羟丙酮（Dihydroxyacetone phosphate DHAP）途径。

粘红酵母（Rhodotorula glutinis）的甘油三酯合成多酶体系主要存在于细胞溶胶中，它们主要是通过蛋白质间相互作用而复合在一起的。这一多酶体系，既可以利用脂肪酰CoA合成甘油三酯，又能够接受游离的脂肪酸，从而合成甘油三酯及其中间体。