3.2.5 36℃不同pH条件里氏木霉产纤维素酶影响 13

3.2.6 讨论与分析 14

结  论 16

参考文献 17

致  谢 18

1 前言

当今社会节能减排已经成为了主流，人们越来越关注新能源，它具有污染少、储量大的特点。生物质能来源于生物质, 地球上较为丰富的生物质能资源是一种无害的能源, 目前成为了关注的焦点。如今主要开发利用是生物质废弃物，秸秆和木柴等原材料具有低廉的价格和充足的供应，它们的木质纤维素含量很高。通过纤维素酶，纤维素才可以降解为可直接利用的能源。另外, 生物酶解具有反应条件温和、环境污染小、装置简单等优点[1]。目前在酿造企业、农牧业、食品业、纺织业等各个领域纤维素酶已被初步应用到。尽管纤维素酶的应用范围比较广泛, 但纤维素酶的应用成本比较高, 研究人员一直在探索如何使纤维素酶的获得更加低廉。因此, 降低纤维素酶的生产成本是纤维素酶真正能够大规模应用于工业生产的关键。

纤维素酶是降解纤维素生成葡萄糖的一组酶的总称[2], 能降解和利用纤维素的微生物大致可分为细菌类和真菌类[3]。里氏木霉因其纤维素酶产量较高、易于培养和控制、产纤维素酶稳定性好、里氏木霉产生的纤维素酶是胞外酶且产生的胞外纤维素酶易于分离纯化、培养及代谢产物安全无毒等特点[4],是最常用于生产纤维素酶的菌种。微晶纤维素作为产酶碳源和诱导物是传统实验室常用的方法, 但微晶纤维素价格昂贵, 不利于工业应用,各国学者仍在进一步选育优良性能的菌株[5]。源:自*优尔`%论,文'网·www.youerw.com/

1.1 里氏木霉

1.1.1 里氏木霉的结构

里氏木霉（Trichoderma reesei）是多细胞的好氧真核微生物，菌落呈广铺的棉絮状，起初为白色致密的平坦菌丝，而后边缘出现浅绿的产孢子丛束区，反面无色。而后边缘出现浅绿的产孢子丛束区，反面无色。分生孢子梗菌丝的短侧枝，透明，多分枝；小梗瓶形，中部弯曲；分生孢子椭圆形或长形，单细胞，透明，无色，壁光滑，成堆时绿色。其作为工业菌株用于生产分解不同植物材料的酶类已有多年历史[6]。

1.1.2 里氏木霉的功能

里氏木霉产生的纤维酶产量很高，达到了里氏木霉胞外蛋白总量的50%。cbh1启动子是一种强启动子。因此遗传改造里氏木霉时，常利用构建载体的序列为cbh1的启动子与终止子，蛋白进行分泌性表达利用cbh1的前导肽序列进行引导重组。里氏木霉合成蛋白和分泌蛋白的能力的能力极好，很可能还具有蛋白修饰性能，与哺乳动物系统相似。

1.1.3 里氏木霉的特性

里氏木霉产纤维素酶要具有以下条件：

1. 里氏木霉产纤维素酶要有高产量。高产菌株可以通过物理或化学诱变获取，里氏木霉容易培养和控制；

2. 里氏木霉适应环境的能力较强，易于控制和管理；里氏木霉产纤维素酶的稳定性好；

3. 通常的生产条件下，里氏木霉不易退化，在生产过程中比较稳定；文献综述

4. 里氏木霉产生的纤维素酶是一种胞外酶，容易分离纯化，发酵结束后，纤维素酶容易与菌体分离纯化得到所需的酶；