摘要采用表型性状分析和16S rRNA 序列及系统发育分析对XB235进行菌株的鉴定。其结果显示， 该菌体为杆状，革兰氏染色为阳性，能产芽孢。在牛肉膏蛋白胨平板培养基上，菌落呈圆形、白色。经16S rRNA 基因序列分析表明，XB235与枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）序列的同源性达100%，所以初步鉴定为枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）。本实验鉴定出菌株种类后，可以为后续研究菌种产酶活性及其运用提供理论基础。72778

Abstract A enzyme-producing strain DW027 was identified based on phenotypic characters and 16S rRNA gene sequencing。 The strain is Gram-positive, endospore-forming, rods in shape。 Colonies of strain DW027 were white, convex and round on NB plates。 Phylogenetic analysis based on 16S rRNA gene homology showed that the strain was closely related to the member of Bacillus subtilis, with which they shared 100 % similarity。

毕业论文关键词：鉴定; 筛选; 枯草芽孢杆菌; 酶活性 

Keyword:  identify； screen；Bacillus subtilis；enzyme activity

目   录

引言 4

1材料与方法 4

1。1菌种 4

1。2主要试剂 4

1。3培养基 5

1。4主要设备 5

1。5样品采集 6

1。6菌株的分离纯化 6

1。7产酶活性菌的筛选 6

1。8菌株的鉴定 6

1。8。1形态学鉴定 6

1。8。2革兰氏染色 7

1。8。3生理生化鉴定[6] 7

1。8。4分子鉴定 9

2结果与分析 10

2。1产酶活性菌株的筛选 10

2。2 XB235的形态鉴定 11

2。3生理生化特征 11

2。4。分子鉴定结果 12

3讨论 12

3。1关于细菌鉴定 12

3。2 枯草芽孢杆菌在水体净化方面的作用 13

参考文献 15

致谢 15

引言

    淀粉酶是一类水解淀粉和糖原的酶类的总称[1]，蛋白酶是一类作用于蛋白质，分解肽键，把蛋白质水解为氨基酸和多肽的酶的总称。淀粉酶和蛋白酶都是非常重要的水解酶，目前在医药、食品、饲料等领域都有很广泛的应用，是国内外产量最多、研究最彻底、应用最广泛的两类酶[2]。它们广泛分布于植物的果实，茎叶、动物的内脏以及微生物分泌的胞外酶中。与从植物和动物中提取淀粉酶和蛋白酶相比，微生物在产酶方面有着得天独厚的优势。首先，微生物在自然界中的分布广泛，易于采集得到，并且很多菌种都可以分泌淀粉酶和蛋白酶，菌株比较选育简单。其次，微生物易于培养，繁殖速度快，生产效率较高。最后，微生物分泌的一般都是胞外酶，提取方法简单。总而言之，微生物分泌的蛋白酶和淀粉酶具有动植物分泌的酶的一切功效、特性，却有着来源广、易提取、成本低、效率高等众多优点。具调查显示，在全部工业用酶中75%为水解酶类，其中，淀粉酶占了很大的比例，有数据显示，淀粉酶在工业酶制剂中的比例为25%[3]。而蛋白酶则是最重要的一类水解酶，每年作为工业用酶的销量都高达60%[4]。在环境保护方面，受污染的水域中，由于水产养殖，有害藻类的暴发以及水生生物的死亡，水底沉积着许多蛋白类、脂肪类、淀粉类的物质，这些成分都导致了水体的富营养化，直接造成了水体的污染。而微生物分泌的淀粉酶和蛋白酶能够很好的分解这些有害物质，从而达到改善水质，净化环境的目的[5]。虽然目前对于微生物生产酶制剂的研究应用已经比较广泛，但是筛选、鉴定一些高产酶活性菌，并且研究其产酶的酶学性质、酶活力等工作仍然有很大的价值。