摘要:随着转基因技术的快速发展,转基因产品逐渐市场化,转基因产品的安全性也受到越来越多的关注,对于转基因产品而言,建立相应的监管制度和检测标准尤为重要。本研究以冬小麦为研究材料,分别使用定性和荧光定量PCR对待测样品中的常用外源基因NOS终止子进行检测分析,来判断该样品是否为转基因产品。76762
毕业论文关键词:冬小麦;外源基因;PCR技术
Abstract: With the rapid development of transgenic technology and transgenic products market gradually, more and more people pay attention to the safety of genetically modified products , for the GM products, establish the corresponding supervision system and testing standard is particularly important。 In this research, we use winter wheat as material, qualitative and fluorescence quantitative PCR to detect exogenous gene NOS terminator, to determine whether the samples for genetically modified products。
Keywords: winter wheat; foreign gene; PCR
目录
1前言 5
2 材料与方法 5
2。1 材料 5
2。2 试剂与耗材 5
2。3 仪器设备 5
2。4 方法 6
2。4。1 DNA的提取与纯化 6
2。4。2引物及探针序列 6
2。4。3 PCR检测 7
3结果分析 8
3。1 DNA提取结果 8
3。2定性PCR检测 9
3。3荧光定量PCR检测 9
结论 11
参考文献 12
致谢 13
1 前言
转基因生物(Genetically Modified Organism,简称GMO)是指利用现代生物技术,将特定的外源基因导入到受体生物中,是受体生物获得某种特定的性状,这种携带外源基因的生物称为转基因生物[1]。以转基因生物为原材料加工的食品称为转基因食品(Genetically Modified Foods,简称GMF)[2]。目前,转基因技术被广泛应用于农作物的改良,主要包括对小麦、水稻、油菜、玉米等的抗虫抗逆性改良[3]。近年来,随着转基因技术的不断发展,转基因产品也逐渐商业化,与此同时,转基因作物,特别是转基因食品的安全性也引起了广泛关注。论文网
目前,大家较为关心的是大量应用转基因生物是否会破坏生物多样性,转基因食品是否对人类的健康造成伤害。真对这一现状,世界各国分别制定了相应的安全标准,并研发了不同的检测方法。近年来,关于转基因检测的报道较多,例如:许爽等使用定性PCR技术对含有卡纳霉素的8个番茄品种进行转基因检测[4],王颖等应用PCR技术检测饲料中的外源基因成分[5],这些检测方法不仅可以有效的检测外源基因,同时也为受体植物的研究提供了可靠的依据[6]。许芳等通过对市场常见玉米产品检测,发现市场上确实存在未经标识的转基因产品,这为有关部门对转基因的监管提供了依据[7]。
PCR是聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction)的简称。是利用核酸复制酶、引物和核酸单体组成元件,在体外完成模板DNA的复制[8]。PCR技术有特异性强、灵敏度高、快速、准确、重复性好等优点[9]。本实验以冬小麦为材料,分别使用定性和定量PCR检测方法判断待测样品中是否含有外源基因NOS终止子。