参考文献 11

前言

桦褐孔菌是一种具有很高药用价值、应用前景广泛的药用真菌。具有治疗癌症、糖尿病等慢性疾病、提高机体免疫力、抵抗衰老的显著效果，被称作是上帝赐给苦难人类的一种神奇的礼物 [1]。近年来，人们对桦褐孔菌的营养、药用价值的研究投入了很多关注，使其变成医药和保健品行业的研发热点。本研究拟对桦褐孔菌中分离的真菌进行抗肿瘤、抑菌及抗氧化活性分析，从中筛选出具有抗菌、抗肿瘤及抗氧化的菌株；对桦褐孔菌伴生菌资源做一个合理的评价。论文网

桦褐孔菌, 属担子菌亚门、层菌纲、非褐菌目、锈革孔菌科、褐卧孔菌属；其学名为斜生褐孔菌（Inonotus obliquus(Fr。)Pila）, 俗称桦树茸、白桦茸。在外文资料中, 其学名常以Inonotus obliquus或Fuscoporia obliqua出现；它主要分布在北纬45 ～ 50°的地区,除了北美的北部、芬兰、波兰、俄罗斯等地，中国的黑龙江、吉林省长白山地区也有分布[2]。桦褐孔菌菌核呈现瘤状, 菌核无柄, 一般直径25 cm～ 40 cm, 外表黑褐色或黑色, 内部黄褐色，后表面深裂, 很硬, 干的时候表现为脆。生长于桦树、榆树、赤杨等活立木的树皮下或砍伐后树木的枯干上,其菌核可以在砍伐后的枯干上生存达6年之久[3]。其化学成分包括叶酸衍生物、芳香物质、多酚类化合物、三萜类化合物、类固醇和生物碱类化合物等[4] 。近年来,很多国家相关学者对该菌的研究变得十分重视,并在研究并试图找到其活性成分，目前已知的活性成有栓菌酸、三萜类化合物、类固醇、桦褐孔菌醇等[5]。

大型真菌伴生微生物是十分常见的，在共生长中发挥着一定的功能；因而必须有伴生菌的存在才能完成其生活史；郭楚燕，胡建伟等发现裂盖马鞍菌子实体内部存在的细菌、真菌、放线菌，有可能为裂盖马鞍菌的伴生菌；纯培养的猪苓菌丝不能形成菌核,但其与伴生菌共培养,无论在实验室培养基上或用树棒栽培,猪苓菌核形成很快且发育正常;伴生菌是猪苓菌丝形成菌核的关键生物因子，添加适量的伴生菌菌丝体或未灭菌的发酵液能提高猪苓菌丝的生物量，提高猪苓菌丝多糖含量[6]；点枝顶孢为四川省分布的黄褐裸盖伞、粪生裸盖伞及裸盖伞205菌株的伴生菌，与其宿主表现为偏利互生关系,并已经达到稳定的共进化平衡,赵迪等利用选择性培养基分离白僵菌的过程中，先后在不同地点和寄主的白僵菌上进行单胞纯化，获得了多株白僵菌伴生菌菌株;并发现伴生菌菌株Snef 5对4种靶标线虫的毒力较好,具有一定的研究价值[7]。

桦褐孔菌伴生菌目前还没有人研究，我们从桦褐孔菌分离了一些伴生菌，证明桦褐孔菌确实存在大量的微生物，对这些真菌进行抗肿瘤和抗氧化等分析，为伴生菌资源的合理利用提供理论依据。

1材料与方法

1。1供试材料

1。1。1实验材料

    9株桦褐孔菌菌核内微生物：从桦褐孔菌菌核内分离得到的伴生菌。由江苏省药用植物生物技术重点实验室提供。

1。1。2活性指示菌

     小麦赤霉病原菌(Gibberella zeae)，苹果轮纹病原菌(Botryosphaeria berengriana)，水稻纹枯病原菌(Thanatephorus cucumeris (Frank) Donk)，茄子黄萎病原菌(Verticillium dahliae)。由江苏省药用植物生物技术重点实验室提供。

1。1。3培养基

      PDB培养基：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，蒸馏水1000 mL，pH=7。0,121 ℃，20 min灭菌。 

0。1 mMol DPPH：DPPH 0。6 mg，0。15 mL无水乙醇，避光配制，即得，临用新配。

PDA培养基：马铃薯200 g，葡萄糖20 g，蒸馏水1000 mL，琼脂20 g，pH=7。0，121 ℃，20 min灭菌