2。3。1标准曲线的建立
准确称取1mg没食子酸,用蒸馏水充分溶解后,定容至10ml,得到浓度为100ug/ml的没食子酸标准溶液。分别精确移取0、0。5、1。0、1。5、2。0、2。5、5ml没食子酸标准溶液于10ml试管中,再分别加入0。5ml Folin-Ciozalteu试剂,摇匀后静置30s。分别加入1ml 12% Na2CO3溶液,摇匀后定容至10ml,在25℃条件下避光放置2h。以蒸馏水替代样品作空白对照,在760nm处测定其吸光度。画出标准曲线,得到线性方程。标准曲线的回归方程为y = 2。3184x + 0。0108,R2 = 0。9952。
2。3。2总酚含量的测定
吸取0。5ml样品液,再分别加入0。5ml Folin-Ciozalteu试剂,摇匀静置30s后分别加入1ml 12% Na2CO3溶液,摇匀定容至10ml,在25℃下避光放置2h。以蒸馏水替代样品作空白对照,在760nm处测定其吸光度。样品中的总酚含量根据没食子酸的标准曲线和式子(1)计算:
总酚含量(mg/100g)=A*100*稀释倍数/M (1)
式中:A——根据标准曲线得出的总酚浓度,mg/ml
M——样品的质量,g
Ps:平行测定三次,用算术平均值表示。
2。4苹果中黄酮的含量测定
2。4。1标准曲线的建立
准确称取5mg芦丁标准品,用70%乙醇定容至10ml,浓度为0。5mg/ml,作为标准溶液。准确吸取0、0。2、0。4、0。6、0。8、1、2ml标准溶液加入70%乙醇配成0、0。05、0。10、0。15、0。20、0。25、0。50mg/ml的标准液。再加入0。5ml 5%NaNO2,静置6min;加入0。5ml 10% Al2(NO3)3,静置6min;加入4ml 4%NaOH,摇匀后加入70%乙醇定容至10ml,充分混匀后静置15min。以1ml 70%乙醇替代样品作空白,在510nm处测定吸光度。画出标准曲线,得到线性方程。标准曲线的回归方程为y = 2。2732x - 0。0049,R² = 0。9999。
2。4。2总黄酮含量的测定
吸取2ml样品液,加入0。5ml 5%NaNO2,静置6min;加入0。5ml 10% Al2(NO3)3,静置6min;加入4ml 4%NaOH,摇匀后加入70%乙醇定容至10ml,充分混匀后静置15min。以1ml 70%乙醇替代样品作空白,在510nm处测定吸光度。样品中的总黄酮含量根据芦丁的标准曲线和式(2)计算:
总黄酮含量(mg/100g)=B*100*稀释倍数/M (2)
式中:B——根据标准曲线得出的总酚浓度,mg/ml
M——样品的质量,g论文网
Ps:平行测定三次,用算术平均值表示。
2。5 苹果中VC含量的测定
2。5。1 2,6-二氯靛酚染料滴定度的测定
称取52mg碳酸氢钠溶解在200ml热的蒸馏水中,然后称取2,6-二氯靛酚50mg溶解在上述碳酸氢钠溶液中。冷却后定容至250ml,过滤至棕色瓶内,保存在冰箱中。每次使用前,用标准抗坏血酸标定其滴定度。即吸取1ml抗坏血酸标准溶液于50ml锥形瓶中,加入10ml浸提剂,摇匀,用2,6-二氯靛酚溶液滴定至溶液呈粉红色15s不褪色为止。同时,另取10ml浸提剂做空白试验。
滴定度按式(3)计算:
滴定度T(mg/ml)=C*V/(V1-V2) (3)
式中:T——每毫升2,6-二氯靛酚溶液相当于抗坏血酸的毫克数
C——抗坏血酸的浓度,mg/ml
V——吸取抗坏血酸的体积,ml
V1——滴定抗坏血酸溶液所用2,6-二氯靛酚溶液的体积,ml
V2——滴定空白所用2,6-二氯靛酚溶液的体积,ml