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摘要：本课题以中国传统美食北京烤鸭为原料，通过研究其水溶提取物对细胞内抗氧化酶含量的影响，来确定最佳培养时间及峰样，首先粗提物（F0）通过超滤、G15凝胶层析制得四个峰样（分别用F1、F2、F3、F4表示），利用细胞（MGC-803胃癌细胞）研究F0、F1、F2、F3、F4在不同时间内对细胞内SOD、NO、MDA的含量的影响，从而比较得出哪个峰样对细胞内抗氧化酶含量影响最大以及不同时间（24h 、36h、48h）对细胞内抗氧化酶含量的影响。根据抗氧化酶含量变化的数据表明：24h为最佳培养时间，经过培养发现SOD、NO、MDA的含量大小较其他培养时间更优且F4对促进细胞内抗氧化酶含量的增加的影响最为明显。6672
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关键词： 水溶性提取物；抗氧化；细胞；酶活
Antioxidant Impact of Water-Soluble Extracts from Roast Duck on Cells
Abstract：The topic to Chinese traditional food Beijing roast duck as raw material, through the study of its water soluble extracts on the intracellular content of antioxidant enzymes, to determine the optimal cultivation time and the peakssamples, first of crude extract (F0) by ultrafiltration, G15 gel chromatography on samples obtained four peaks (respectively F1, F2, F3, F4 shown) using cell (MGC-803 gastric cancer cell) of F0, F1, F2, F3, F4 at different times of intracellular SOD, NO, MDA content influence, thus comparisons of what kind of peak levels of intracellular antioxidant enzymes greatest impact and different times (24h, 36h, 48h) on intracellular antioxidant enzymes in rats. According to antioxidant enzyme content in the data indicate: 24h culture is the best culture time, after training found, SOD, NO, MDA content size incubation time better than others and F4 intracellular antioxidant enzymes to promote an increase in the content of the most obvious effects.
Keywords: water-soluble extracts；antioxidant；cells；enzyme activity
目 录
1 简介 1
1.1 北京烤鸭 1
1.1.1 北京烤鸭简介 1
1.1.2 北京烤鸭的营养价值 1
1.2 美拉德反应研究及发展现状 2
1.2.1 美拉德反应机理 2
1.2.2 美拉徳反应产物抗氧化性及其国内外研究 3
1.3 抗氧化活性研究 4
1.3.1抗氧化物质的作用机理 4
1.3.2 抗氧化活性的评价方法 5
1.4 细胞评价的检测指标 7
1.4.1 MTT比色法测定细胞存活率 8
1.4.2 超氧化物歧化酶（SOD） 8
1.4.3 丙二醛（MDA） 8
1.4.4 一氧化氮（NO）和一氧化氮合酶（NOS） 9
1.5 本课题的研究目的与研究内容 9
2 实验材料及方法 11
2.1 实验材料 11
2.1.1 实验材料及试剂 11
2.1.2 主要仪器和设备 11
2.2 实验方法 11
2.2.1 样品的前处理 12
2.2.2 细胞的基础培养 12
2.2.3 细胞培养和加样过程 13
2.2.4 细胞内抗氧化酶活性测定 13
3 结果与讨论 17
3.1蛋白含量的变化 17
3.2 培养时间的选择 17
3.2.1 SOD酶活力的变化 17
3.2.2 MDA含量的变化 18
3.2.3 NO含量的变化 19
3.2.4培养时间的确定 19
3.3 NO的反馈抑制及NOS酶的活力 20
3.3.1 TNOS酶活力 20
3.3.2 iNOS酶活力 20
3.4样品对细胞抗氧化能力的影响 21