黄酮类化合物是一类广泛存在于自然界中的具有2-苯基色原酮结构的化合物，具有抗肿瘤、抗炎、镇痛、抗氧化自由基、抗菌及抗病毒等多种重要的药理活性[4]。黄酮类化合物是一类重要的天然有机化合物,是植物在长期自然选择过程中产生的一类次生代谢产物. 它广泛存在于高等植物及羊齿植物的根、茎、叶、花、果实等中,在种类方面算得上是品种繁多，数量上更是数不胜数。黄酮类化合物具有很多重要的药理作用,在治疗疾病方面有着不可估量的价值，它们拥有抑制酶的活性、抗癌、抗菌、抗糖尿病并发症等功能, 且无毒无害,对人类的肿瘤、衰老、心血管病等退变性疾病的治疗和预防有重要意义,它作为弱雌激素,  在治疗妇女更年期综合症方面有很好的应用前景[5]。所以本实验追求在废弃菱角壳中提取出黄酮是十分具有意义的，黄酮类化合物的价值已经不言而喻，而在废弃菱角壳中提取出价值巨大的黄酮类化合物无疑是“变废为宝”，在资源利用方面有着一定的价值。本实验利用紫外分光光度法[4]对芦丁标准品的最大最大吸收峰处和自大吸收波长的菱角壳萃取液进行吸光度测定。黄酮类化合物一般难溶于水，但易溶于乙醇、甲醇、乙醚等，因黄酮类化合物呈酸性，故可溶于碱性水溶液中。因此本实验采用甲醇和乙醇两种有机溶剂，并以乙醇为提取液。绝大多数黄酮类化合物都可以与铅盐、镁盐、铝盐等生成有色的络合物，因此本研究采用三氯化铝比色法，以三氯化铝作为显色剂，进行显色反应，然后测定吸光度。

目前用超声-微波协同萃取菱角壳中的黄酮的相关研究还未见报道。超声-微波协同萃取是近年发展起来的一种新方法，具有简单、快速、高效的特点，已被广泛用于天然产物有效成分的提取尤其在黄酮类、萜类、多糖等有效成分的提取上效果更好[6]。文献综述

2  实验材料与方法

2.1  材料与试剂

原料：菱角壳，于大同路农贸市场购买洪泽湖野生菱角。

预处理：将菱角洗净，去除菱角皮、菱角肉，放入烘箱60℃烘干，然后用粉碎机粉碎成末，备用。

试剂：芦丁标准品，上海永叶生物科技有限公司；无水乙醇，江苏强盛功能化学股份有限公司；甲醇，南京化学试剂有限公司；三氯化铝（结晶），天津市大茂化学试剂厂；研究中所用的水均为纯水。

2.2  仪器

CW-2000型超声-微波协同萃取仪，上海新拓微波溶样测试技术有限公司；FA-2004B型电子天平，上海精科天美科学仪器有限公司；UV757系列紫外可见分光光度计，上海精科公司；六两装高速万能粉碎机，浙江屹立工贸有限公司；DHG-9430B型电热恒温鼓风干燥箱，上海三发科学仪器有限公司； TDL-5-A型离心机，上海安亭科学仪器厂。

2.3  实验方法

2.3.1  标准溶液的配制

精密称取在120℃下干燥至恒定质量的芦丁标准品20.00mg，置100ml三角烧瓶中，加甲醇40ml，超声-微波处理溶解，定容至100ml，得到0.2mol/L的芦丁母液，备用。

2.3.2  显色试剂的配制

精密称取ALCL31.34g，加甲醇定容至100ml，配置成0.1mol/L的显色试剂，备用。来!自~优尔论-文|网www.youerw.com

2.3.3  最大吸收峰的确定

精密移取芦丁母液1ml，置于10ml容量瓶，加入2ml 0.1mol/L的ALCL3溶液，50%乙醇定容至刻度，充分显色25min，在200nm-600nm范围内扫描，记录吸光度值，根据紫外光谱图，确定其最大吸收波长为420nm。

2.3.4  标准曲线的建立

从芦丁标准品溶液中，精密移取0,0.2,0.4,0.6,0.8，1.0ml，分别至6个10ml的容量瓶中，再分别加入0.1mol/L的ALCL3溶液2ml，然后加50%乙醇定容至刻度，摇匀，最后静置显色25min。在最大吸收波长420nm处测定吸光度，以浓度（C）为横坐标，吸光度（A）为纵坐标绘制标准曲线，得回归线性方程为：Y=3.703X-0.027，R2=0.984。