脂肪酸分析方法概述常用的脂肪酸分析步骤主要包括：样品中脂类物质的提取，有时采用薄层色谱（TLC）或者固相微萃取（SPE）的方法分离游离脂肪酸；脂肪酸的衍生（一般甲酯化）；脂肪酸衍生物的提取及分析，其中脂肪酸的测定最常采用气相色谱法。本文按照以上步骤来介绍脂肪酸的分析方法。81171

2脂肪酸的提取方法

本节主要介绍脂肪酸的提取方法，分为液-液萃取法和近年来脂肪酸分析的新技术。在液-液萃取法中主要介绍了氯仿-甲醇法、Dole 法和MacGee法、正己烷-异丙醇法；介绍了超临界流体提取技术、超声波辅助提取技术、微波辅助提取技术等常用的新技术。

(1)液-液萃取法

本部分对氯仿-甲醇发、Dole 法和MacGee法、正己烷-异丙醇法提取脂肪酸及各方法特点的的介绍，

A。氯仿-甲醇法

从动物组织样本中提取酯类最经典的的方法是氯仿-甲醇混合溶剂提取法，1957年首次由Folch等首先提出，经过不断地改进后，现已受到了广泛的应用。然而该法本身也是存在着局限性，特别是氯仿具有高毒性和高刺激性，为克服该缺点，有学者用性质相近、毒性较小的二氯甲烷取代氯仿提取脂质，发现两者容剂消耗量和提取效率相近，将二氯甲烷作为氯仿的理想替代物[1]。

B。Dole 法和MacGee法论文网

Dole 法（层析加萃取）和MacGee法（直接萃取）也是常用的酯类的提取方法。Dole 法采用异丙醇/ 石油醚/ 0。05 m ol 硫酸（体积比为40:10: l）的混合提取液提取脂质，经薄层层析（TLC）分离、洗脱，可分别得到游离脂肪酸和酯化脂肪酸。MacGee法则采用甲醇、正己院和磷酸提取酯类，用磷酸反复提取，可得脂类中的非酯化脂肪酸。

何桂珍等人[2]用这两种提取方法提取了血浆中的非酯化脂肪酸，并做了比较，由结果可知两种方法都能达到较好的重复性和回收率。其中Dole 法步骤繁琐，所需时间较长，损失更大，难以测到亚麻酸和花生四烯酸，但在层析时可以将不同的酯类物质分开，适用于组织和细胞膜脂肪酸的分析；MacGee法样品用量较少，步骤简单，可检测到全部的必需脂肪酸，适用于血浆中非酯化脂肪酸的提取。

C。正己烷-异丙醇法

正己烷-异丙醇法也可用于生物样本中脂肪酸的提取，在张军田等[3]介绍了以该法提取组织中的酯类，并与氯仿甲醇法进行了比较。正己烷-异丙醇提取脂质虽然回收率较低，但是毒性低，对人体损害小；溶剂的密度低、相对不易挥发，有利于离心除去组织残留物，利于储存；提取的脂质液中基本不含色素，可减少对色谱柱的影响，利于对肝脏和红细胞膜中酯类的提取和色谱分离。谭力[4] 等采用该混合溶剂（4:1 v/v）提取血清中的脂肪酸，不衍生直接采用化学键合的FFAP柱的气相色谱法分析游离脂肪酸，除乙酸和丙酸外，其余脂肪酸均可以检测出。 

(2)提取新技术

随着科技的不断的发展，许多酯类提取的新技术越来越成熟，应用更为广泛。相较于传统的提取技术而言，这些新技术具有提取率高、容积消耗少、提取时间短、提取速度快，对环境没有污染等优点。以下对近年来常用的超临界流体提取技术、超声波辅助提取技术、微波辅助提取技术、加压液体萃取四种新技术进行介绍。

A。超临界流体提取法（SFE）

超临界流体提取法（SFE）利用某些物质（如二氧化碳）处于超临界的状态萃取分离有机物，它的提取效率高、操作温度低、且有较宽的压力、产品无溶剂残留和环境污染的问题。

B。超声波辅助提取法（UAE）