2。材料与方法
2。1 供试材料
菌株:YC-6 枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)一种分离自水稻土壤的菌种。
蔬菜品种:澳洲美玲夏美青梗菜,产自福建省建阳市晓富种子有限公司。
培养基:皿内培养为PDA培养基:蔗糖20g,土豆200g,琼脂15g,蛋白胨5g,蒸馏水1000ml。发酵培养为PDA培养液:蔗糖20g,土豆200g,蛋白胨5g,蒸馏水2000ml,PH7。2-7。4。
培养土:网上购买的柴米河牌营养基质,主要含有有机成分(80%)包括发酵腐熟的水稻秸秆、稻壳、锯木屑和酒糟。无机成分(20%)主要含有蛭石和粘结剂。
2。2 试验方法文献综述
2。2。1 菌体的活化与培养
将煮好的PDA培养基倒入灭菌的培养皿中,冷却凝结至室温,将供试菌液吸取100μl采用涂布平板法涂抹于培养基表面,放入恒温培养箱中倒置培养过夜。挑取单菌落采用平板划线法划线于灭菌的培养基上,放入恒温培养箱中倒置过夜培养重复两次。(见图1)将PDA培养液倒入50ml规格的锥形瓶中,挑取上述培养基上的单菌落放入培养液中,摇床培养,180-200rpm/min,30-37℃,24-36h。倒取30mlPDA培养液于50ml规格的锥形瓶中,吸取3ml上述培养后的菌液,摇床培养,180-200rpm/min, 30-37℃,24-36h。取500ml规格的锥形瓶,加入300ml培养液,10-15ml上述菌液,按此配比配置2L备用