CaSR介导色氨酸诱导猪胃胃肠激素分泌的规律(3)
1．4．2 试验处理 试验所使用猪胃组织均采样自江苏省南京市某屠宰厂。
使用Kreb’s培养液作为基础溶液，设置对照组（Kreb’s培养液）和添加Trp组，Trp组终浓度分别为20 mM、50 mM，置入蓝口瓶中，采用表面灌流系统对猪胃底、胃窦组织进行灌流试验。于灌流0 min开始收集各组灌流液，每隔20分钟收集一管灌流液，连续收集120分钟。并在灌流结束后，测定收集液中生长抑素和胃泌素的浓度。
使用Kreb’s培养液作为基础溶液，并在基础Kreb’s培养液中分别加入DMSO作为对照组、CaSR特异性激活剂cinacalcet作为处理组，使用表面灌流系统对猪胃底、胃窦组织进行灌流。同样，于灌流0 min开始收集各组灌流液，每隔20分钟收集一管灌流液，连续收集120分钟。并在灌流结束后，测定收集液中的生长抑素和胃泌素的浓度。
使用Kreb’s培养液作为基础溶液，在基础Kreb’s液中分别加入DMSO作为对照组、20 mM Trp和20 mM Trp+25 µM CaSR特异性阻断剂NPS2143作为处理组，采用表面灌流系统对猪胃底、胃窦组织灌流。同样，于灌流0 min开始收集各组灌流液，每隔20分钟收集一管灌流液，连续收集120分钟。并在灌流结束后，测定收集液中的生长抑素和胃泌素的浓度。
1．5 指标测定方法
利用酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测收集的灌流液中胃肠激素SS和gastrin浓度。严格依照猪胃肠激素SS和gastrin的ELISA试剂盒（Aogene biotech Co., Ltd.，中国，南京）说明书检测灌流液中胃肠激素SS和gastrin浓度。
1．6 数据统计分析
所有数据使用Excel 2013初步整理后，使用SPSS 20.0软件中的单因素方差(one-way ANOVA)模型进行实验数据差异显著性检验分析，使用S-N-K test对数据进行多重比较，P＜0.05 为差异显著