3.1RNA浓度测定结果 6
3.2扩增检测 7
3.3定量分析与差异性表达 8
4讨论 10
5结果 11
参考文献 11
致谢 13
图清单
图序号 图名称 页码
图3-1 TSC1溶解曲线 7
图3-2 内参溶解曲线 7
图3-3 TSC1扩增曲线 8
图3-4 内参扩增曲线 8
图3-5 TSC1基因在各组织中相对表达水平图 9
表清单
表序号 表名称 页码
表2-1 实验仪器与设备 3
表2-2 PCR反应条件 5
表2-3 荧光定量反应体系 5
表3-1 RNA浓度纯度表 6
表3-2 TSC1在组织中的相对表达量 9
1绪论
山羊是我国饲养较早的家畜之一,距今已有几千年历史,由于山羊本身具有肉质鲜美,产肉多等特点主要作为肉用羊饲养。因为羊肉风味独特且营养价值高,所以羊肉产业在肉产品市场中也占有一席之地,其受喜爱程度仅次于猪肉和鱼肉,随着人们消费水平的提高,羊肉产业将得到进一步发展。山羊养殖已由原先的家养、散养到如今的大型化、专业化养殖,形成了养殖集中,数量繁多,品种齐全的养殖模式,不仅改善了人民的饮食水平,更促进了畜牧业经济的发展。随着山羊养殖规模的增大以及人们对山羊产品数量和质量要求的提高,畜牧业上对于山羊的养殖和繁育技术也提出来更高的要求,期望获得经济价值最大化、品质性能最优化的山羊产品。为此,我们需要不断更新技术,从基因水平到个体水平全面提高山羊产品的性价比,从而进一步提高人民的生活水平。论文网
目前对TSC1基因的相关研究主要是以TSC1-TSC2复合体为研究对象。该复合物通过抑制胰岛素/IGF通路以及营养信号转导途径(mTOR介导的信号通路)来抑制细胞生长和繁殖[1]。一方面,TSC1-TSC2复合物抑制胰岛素/IGF通路,有研究发现在小鼠骨骼肌中抑制IGF信号通路可导致肌肉萎缩,由此可推测TSC1对肌肉发育有重要的调控作用[2];另一方面,该复合物是雷帕霉素靶蛋白(mTOR)介导的信号通路的负性调节因子。TSC1/2-mTORC1信号通路在各信号通路的交接点上能够接收各条信号转导通路的信息,作出反应,调控细胞生长、繁殖、大小和适应外界压力等[3]。一旦有生长因子、能量、营养、压力等信号刺激该通路如细胞缺乏营养或能量,葡萄糖水平异常低或缺氧,mTOR通路为适应压力需要通过调控来影响细胞的生长、增殖、分化、代谢和调节能量的稳定。基于这两个方面的原因,若TSC1基因发生突变,将不能抑制细胞生长和增殖,表现为肿瘤在多种组织系统中广泛异常生长并产生相应临床症状,称为结节性硬化症(TSC)[4]。虽然TSC错构瘤的发生部位无法预测,可能发生在大脑、眼睛、心脏、肺、肾脏、肝脏等多种组织或器官,但他一般不会发展为恶性肿瘤。另外,TSC1基因缺失的细胞比正常细胞对内质网压力更敏感,葡萄糖缺乏可以诱导内质网压力,严重时会产生细胞凋亡。