桑叶中总黄酮含量所占桑叶干重比例相对较高,是所有植物茎叶中含量较高 的一类化合物,也是桑叶中化学成分研究最多、化学结构明确的一类化合物。桑 叶黄酮中含有芸香苷、芳香苷、槲皮素、槲皮苷、槲皮素-3-葡萄糖苷、桑苷、 异槲皮苷、山奈酚-3-葡萄糖、黄芪黄酮等化合物[7, 13],有学者研究显示,马桑叶 中黄酮醇及其苷类的数量较大,种类也较多,且主要集中在水相中,其基本骨架 为山奈酚和槲皮素[14]。

1。3 桑叶黄酮的提取

桑叶黄酮的提取方法众多,主要有热水、醇、稀碱、及溶剂提取法[29],我 国桑叶黄酮提取工艺主要采用传统的水提以及醇提法[1-2, 5-7, 14-23, 30],使用醇提或 水提法的原因可能是桑叶黄酮中含有大量以山奈酚、槲皮素、桑苷等为基本骨架 的黄酮醇及苷类,根据相似相容原理,桑叶黄酮易溶于醇溶液或水溶液[14, 18], 综合考虑使用的安全性、便捷性与提取效率,使用的醇溶液通常为乙醇溶液。如 何高效地提取桑叶黄酮是众多研究工作开展的前提和保证,许多学者围绕提取方 法和提取工艺对桑叶黄酮提取效率的影响开展了大量的研究[1-2, 5-7, 14-23]。

1。3。1 桑叶黄酮提取得率的主要影响因素

桑叶黄酮提取率因桑叶品种、产地、采购时间的不同而不同[18-19];此外,提 取方法、提取条件的不同对桑叶黄酮提取率也有一定影响,许多学者采取传统的 回流法或水浴的方法提取桑叶黄酮[15, 20-21],此法中,影响提取率的主要因素有提 取时间、提取温度、乙醇浓度以及溶液液料比,回流提取中提取次数取代提取温 度作为一个主要影响因子;传统水提或醇提法耗时长,因此有学者在此基础上采 取微波或超声波辅助的方法提取桑叶黄酮[17-18, 22],取得了良好的效果,得到了高 于传统水提或醇提法的桑叶黄酮提取率;此改进方法中,微波或超声波功率、处 理时间,液料比,乙醇浓度以及提取次数对黄酮提取率会产生主要影响。实践经验表明,影响因素不宜设置过多,通常以 3-4 个主要因素为主,影响因素设置过 多将增加试验次数、实验的复杂程度,增加后续正交试验或响应面试验的难度, 设置过少势必导致主要影响因子遗漏,致使最终优化结果不佳。建议通过单因素 试验剔除不敏感因素,选择敏感的因素及其合适水平进行工艺优化试验。

目前,我国研究者在桑叶提取工艺优化过程中常用的两种方法为:正交试验 法与响应面法。

在工艺优化之前,多进行单因素试验确定合适的影响因素及其因素水平;提 取率多以芦丁溶液标准曲线的绘制及其方程计算得到[14-22]。

1。3。2 不同桑叶黄酮提取方法的比较

为方便总结与评价正交试验法、响应面法在桑叶黄酮提取工艺优化中的应用 以及二者在应用过程中的本质区别,本文将采取表格统计的方式,对具有代表性 的研究进行响应面法与正交试验法纵向对比、各因素横向对比将相关研究者所做 的部分研究成果展示如表 1-1 所示,其中对比内容主要包括试验次数,提取温度

(ºC)、提取时间(min)、液料比(mL/g)、乙醇浓度(%)、超声(微)波功率论文网

(W),提取方法以及最后的总黄酮得率(%)。

由表 1-1 可知,类似的优化试验,正交法的试验次数远远少于响应面法,但 由于提取方法的差异对黄酮得率的影响较大,因此不可在不同方法之间对响应面 法与正交法的本质区别与应用特点进行深入的讨论,该讨论的进行必须建立在提 取方法统一的基础上;对比显示,醇提法所得黄酮得率较高,这与 1。3。1 节最开 始的“相似相容原理”推断相符,又该法具有试验方法简捷、试验因素易控、因 素个数及水平合理的优点,这正是本文采用醇提法进行正交法与响应面法优化提 取工艺应用特点比较的重要原因。

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