表1 实验材料
种名 产地 个体数 编号
榧树 T。 grandis 磐安大盘山 2 1-2
榧树 T。 grandis 临安天目山 1 7
九龙山榧 var。 jiulongshanensis 遂昌王村口 4 3-6
九龙山榧 var。 jiulongshanensis 磐安大盘山 8 8-15
巴山榧 T。 fargesii 临安清凉峰 3 16-18
长叶榧 T。 jackii 仙居神仙居 2 19-20文献综述
2。2。2 PCR扩增
用于PCR扩增的反应体系为25 uL:12。5 uL 2×buffer,1 uL 正反向引物,0。3 uL Taq酶,1 uL DNA,9。2 uL ddH2O。扩增的引物为trnL-trnF(5’-CGAAATCGGTAGACGCTACG-3’、5’-ATTTGAACTGGTGACACGAG-3’)和trnM-trnS(5’-GAGAGAGAGGGATTCGAACC -3’、5’-CATAACCTTGAGGTCACGGG-3’)。
反应程序如下:94℃变性5 min,94℃变性30 sec,52℃-58℃退火40 sec,72℃延伸1 min,36个循环后72℃延伸10 min。