1.6黏度法测定β-葡聚糖的相对分子质量

β-葡聚糖在体内的许多生理功能的功效均与其黏度大小有关，而β-葡聚糖的分子结构、相对分子质量和浓度都会对其黏度造成影响，目前研究认为不同的提取工艺和测定方法都会影响β-葡聚糖分子量[18]。

聚合物完全溶解并分散在良溶剂中。当稀释的聚合物溶液流动时，分子链之间发生摩擦，溶液变得比纯溶剂更粘稠。稀溶液中聚合物的粘度是流动时内部摩擦的反映，溶剂分子之间的内部摩擦表示的粘度称为溶剂粘度。聚合物分子的内部摩擦以及聚合物分子和溶剂分子之间的内部摩擦以及溶剂分子之间的摩擦总体上是聚合物溶液的粘度。聚合物溶液的粘度与其结构、溶液浓度、溶剂、温度等因素密切相关。聚合物的粘均分子量可以通过测量稀释的聚合物溶液的相对粘度来计算。

1.7生理活性测定

1.7.1体外保湿

β-葡聚糖是一种自然的高聚多糖糖，可在人体皮肤上产生透明、透气的薄膜，可以隔断环境中的有害物质对皮肤造成损害，其大分子结构可以锁住水分，防止水分流失，具备高效保湿性。

1.7.2抗氧化

多糖可以与机体的多种自由基结合，使游离自由基消减，达到抗氧化的作用。在机体内不竭的氧化代谢的过程当中会不可避免的持续产生羟基自由基、超氧阴离子等各种活性氧自由基，这些自由基会对细胞造成重大伤害。

DPPH是一种普遍用来评价抗氧剂清除自由基能力的物质，一种稳定的有机氮自由基，

其分子中的氮原子可以接受氢原子或电子来形成稳定分子，可在517nm测甲醇或乙醇溶液中DPPH的吸光度来评估多糖的抗氧化能力。

在细胞中羟基自由基是由Fenton反应所产生的，羟基自由基也是活性氧的代表之一，可以与大多数的生物大分子反应。Fenton反应已经普遍用于评价羟自由基清除活性能力。

1.7.3体外抑菌

目前研究认为酵母葡聚糖及其衍生物对大肠杆菌的抑制作用并不一致，可能是由于酵母葡聚糖的制备方式不同，造成制备得葡聚糖在构造上存在差异，也可能与试验用的大肠杆菌菌株不同有关[14]。

1.8羧甲基化増溶

羟甲基化反应是指有机化合物中的氢被羟甲基取代的反应。一般从酵母中制备获得的β-葡聚糖难溶于水，应用受到很大限制。对其进行化学改性改良β-葡聚糖的溶解性,是使酵母β葡聚糖获得更好开发利用的有效途径。羧甲基化葡聚糖是在高纯度葡聚糖的基础上再次深加工而得，具有很强的水溶性，解决了酵母β-葡聚糖极难溶于水的难题，扩展了其应用领域。

1.9本项目研究目的和研究意义

研究表明，酵母β-葡聚糖具有低血糖、降血脂，提高人体免疫力等生物学活性，因此当前β-葡聚糖的发展及研究目前非常热门。最具生物活性的β-葡聚糖是酵母β-葡聚糖。酵母β-葡聚糖在诸如食品，药品，化妆品和水产养殖等许多行业具有巨大的商业价值。中国酵母资源非常丰富，经过充分加工，利用竹材制浆废水、稻谷加工副产品和废弃土豆汁等作为培养基，可达到高效的废物利用，社会和经济效益良好。

β-葡聚糖可广泛应用于医药、食品、化妆品等领域，实现了产业的废物利用及效益高效化，在现实中具有非常高的实用价值。本次实验设计从产朊假丝酵母细胞壁中通过高压微射流法、自溶、高温浸提和复合酶法等提取工艺来产出具有较高经济价值的β-葡聚糖，采用过氧化氢溶液处理和超声波等绿色可行的条件制备得到不同分子量的β-葡聚糖，并进行体外保湿、抗氧化、抑菌等生物活性研究。