2 材料与方法
2。1 菌种、培养基与试剂的准备以及配置方法
表2。1 实验试剂
试剂名称 型号及规格 生产厂商
1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH) A。R 上海华蓝化学科技有限公司
碳酸钠(食品添加剂) A。R。 山东海化股份有限公司纯碱厂
葡萄糖 A。R。 上海润捷化学试剂有限公司
马铃薯葡萄糖琼脂(PDA) HB0233 青岛高科园海博生物技术有限公司
麦芽浸粉肉汤(MEB) CM176 北京陆桥技术有限责任公司
结晶紫染液 K4003 温州市康泰生物科技有限公司论文网
无水乙醇 A。R。 上海泰坦科技股份有限公司
去离子水 自制 上海应用技术学院
表2。2 筛选前的酵母菌种
菌种来源 提供方
黄酒酒糟 浙江塔牌绍兴酒有限公司
泡菜水 上海应用技术大学
那曲牦牛奶 上海复旦大学
林芝奶牛奶 上海复旦大学
(1)PDA培养基:使用电子天平称取4。0gPDA培养基固体,与100mL去离子水混合于锥形瓶中,121℃,102。9kPa高温高压灭菌20分钟备用,用时使用加热板煮沸等到冷却至室温后倒入一次性平板。每100mL培养基可以倒4至5个平板。
(2)MEB培养基:使用电子天平称取4。0gMEB培养基固体,与100mL去离子水混合于锥形瓶中,121℃,102。9kPa高温高压灭菌20分钟备用。
(3)30%甘油冻藏保护液:用100mL量筒量取30ml甘油及70mL去离子水,装入锥形瓶中灭菌后备用。
(4)DPPH溶液:使用分析天平采用减量法称取0。004gDPPH固体于50mL棕色容量瓶中,使用无水乙醇定容,放置在黑暗条件下保存,3。5小时内使用完毕[13]。
(5)饱和食用碳酸钠溶液:在室温20℃下,使用电子天平称取21g碳酸钠固体,加入容量瓶中去离子水定容配制约100mL的溶液,使碳酸钠充分溶解后备用。
(6)苹果汁:量取14mL浓缩苹果汁与86mL去离子水,混匀,使用饱和食用碳酸钠溶液调pH值至pH=6。5,灭菌后使用。
2。2 仪器与设备
表2。3 实验仪器
仪器 型号及规格 生产厂商
超净工作台 SW-CJ-1FD 日本AIRTECH株式会社
隔水式培养箱 SPX-150B-Z 上海一恒科学仪器有限公司
pH计 DELTA 320 梅特勒-托利多仪器(上海)有限公司
微型漩涡混合仪 XW-80A 上海沪西分析仪器厂有限公司
电子天平 YP-100ZN 河南恒信仪器设备有限公司
分析天平