转化生长因子β（transforming growth factor beta，TGF-β）属于TGF-β超家族中的一员，参与调节细胞生长和分化。除TGF-β外，这一家族还包括以下几个亚家族：缪勒氏管抑制质、骨形成蛋白、活化素和抑制素，在每个家族中都分别包含结构相似但功能不同的几个成员[1-3]。TGF-β超家族成员发挥生物学效应，通常是以作为配体的形式，而TGF-β的受体则存在许多细胞表面，本实验所要探究实验的转化生长因子β-Ⅱ型受体（transforming growth factor beta reception-Ⅱ,TGFBR2）就是属于TGF-β家族的一个重要受体。

人体中TGFBR2的结构已研究清楚，它的本质是包括以下四部分（信号肽、胞外区、跨膜区和胞内区）的跨膜蛋白，由567个氨基酸组合而成。研究表明，TGFBR2基因在大多数的组织和细胞中均有表达[4-9]。以往对于转化生长因子β受体生物学功能的研究主要在三方面：妊娠过程中的胚胎发育、参与组织修复和炎症等[4,8-12]，但近年来还发现了其在促进细胞生长、分化，调节免疫功能等方面的作用。在人体上，TGFBR2基因的缺失会导致发育受阻以及畸形[13]。在骨骼发育方面，Anna[14]等人研究发现通过在小鼠的四肢敲除TGFBR2基因，由于TGF -β传导信号中断，致使小鼠的四肢指骨关节缺失。Serra[15]等进一步证明了TGFBR2基因是头盖骨发育的必须因子；在神经系统发育方面，Maurizio[16]等人研究发现TGFBR2基因可以调控神经膜细胞的增殖，降低异常凋亡的出现。此外，Schilling[17]发现TGFBR2基因更是参与了卵泡发育、胚胎植入与发育等方面。以上研究表明，TGFBR2基因在调节动物细胞的生长分化、促进卵泡发育和提高繁殖性能方面具有极其重要的作用，值得我们进一步深入研究。

目前，对于湖羊有许多研究报道，但在分子水平上对湖羊TGFBR2基因遗传多态性及其生长性状的关系的研究还没有报道。因此，基于以上TGFBR2基因的研究进展，本实验拟以具有重要经济价值的湖羊为研究对象，利用PCR-SSCP技术和DNA测序方法对该基因的多态性进行实验检测，并将发现的TGFBR2基因SNPs与相应的生长性状进行遗传效应的关联分析，从而为湖羊的选育提供参考。

2 材料与方法

2.1实验材料

2.1.1 实验动物样本来源

本实验动物为湖羊，共80只，选自徐州市大郭庄机场养羊场。在耳尖部用75%酒精棉球消毒后，剪取部分耳组织样置于70%乙醇中，立即放入冰盒带回实验室，并于-80℃保存备用。

2.1.2体尺指标的获得文献综述

参照《家畜育种学实验指导》[18]介绍的方法，当场测量实验羊只的体尺指标，包括：体高、体长、胸围、管围等。

2.2主要试剂与仪器

2.2.1主要试剂

（1）DNA提取：

DNA抽提缓冲液（STE）（0.5 mol/L EDTA、1mol/L Tris.Cl、5mol/L NaCl、10% SDS）、蛋白酶K (20 mg/kg)、饱和酚、氯仿、异戊醇、无水乙醇(-20℃）、70%乙醇（-20℃）、DEPC-超纯水；

（2）电泳

琼脂糖凝胶电泳：琼脂糖、10×TBE缓冲液（硼酸、Tris、0.5mol/L EDTA）、10×Loading Buffer、MarkerⅢ、核酸染料（EB）；

聚丙烯酰胺凝胶电泳：30%丙烯酰胺、10×TBE缓冲液、ddH2O、四甲基乙二胺（TEMED）、10%过硫酸铵（APS）、硝酸银（AgNO3）、氢氧化钠（NaOH）、甲醛；

（3）PCR-SSCP：

Taq DNA聚合酶、dNTP、10×PCR Buffer（含Mg2+）、变性缓冲液（甲酰胺、0.5mol/L EDTA、0.025% 溴酚蓝、0.025% 二甲苯青、甘油）；

2.2.2仪器设备

表2-1 仪器与设备

Table 2-1  Apparatus and equipment

 仪器名称